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线粒体实验.ppt
动物细胞线粒体的活体染色;【实验目的】
1. 掌握光镜下线粒体的形态和分布。
2. 初步掌握细胞器的活体染色方法。;【实验原理】;
;;【实验内容与方法】;;2、鼠肝细胞活体染色显示线粒体
(1)处死小白鼠,立即剖腹取出肝脏,切取肝脏边缘较薄的肝组织一小块。
(2)放入盛有Ringer氏液的平皿内洗去血液(用镊子轻压),再用吸管吸去Ringer氏液。
(3)在小培养皿内滴加詹纳斯绿B染液。注意染液不要太多,要使肝组织的上半部分暴露在空气中,而不可使组织块完全淹没,这样细胞内线粒体的酶系可被充分氧化而使线粒体易于着色。染色处理的时间一般在30分钟左右,当组织块的边缘已染成蓝绿色时即可。
(4)用两根解剖针从组织块上分离细胞。即用一根解剖针压住组织块,右手用另一解剖针往一个方向挑取组织块边缘的细胞。
;(5)用小吸管将分离下来的细胞吸到载玻片中央的Ringer液中,盖上盖玻片,吸去多余水分。
(6)将制好的标本放在光镜下,先用低倍镜和高倍镜找到肝细胞,然后转换成油镜仔细观察。在油镜上可见肝细胞中的线粒体被染成蓝绿色,呈线条状或颗粒状,在细胞核周围分布较多。在观察时,注意要不断地缓慢来回转动细调焦螺旋,使盖玻片可以上下缓慢地移动,这样可使肝细胞经常得以氧化,从而使线粒体能较好地着色,有利于观察。
;;【作 业】
一、写实验报告
二、绘图:线粒体在光学显微镜子下的形态结构
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