小鼠白细胞介素-6(IL-6)说明书40.pdfVIP

小鼠白细胞介素-6 （IL-6 ）酶联免疫分析 （ELISA ） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相 关液体样本中白细胞介素-6 （IL-6）含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白细胞介素 6 （IL-6 ）水平。用纯化的小鼠 白细胞介素6 （IL-6 ）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细 胞介素 6 （IL-6 ），再与 HRP 标记的白细胞介素6 （IL-6 ）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗 体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在 酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素6 （IL-6 ）呈正相关。用 酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度 （OD 值），通过标准曲线计算样品中小鼠白细胞介素 6 （IL-6 ）浓度。 试剂盒组成： 试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置 保存 说明书 1 份 1 份 封板膜 2 片 （48 ） 2 片 （96 ） 密封袋 1 个 1 个 酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存 标准品：135pg/mL 0.5ml ×1 瓶 0.5ml ×1 瓶 2-8℃保存 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶 1.5ml×1 瓶 2-8℃保存 酶标试剂 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8℃保存 样品稀释液 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8℃保存 显色剂 A 液 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8℃保存 显色剂 B 液 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8℃保存 终止液 3ml ×1 瓶 6ml ×1 瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液 （20ml ×20 倍）×1 瓶 （20ml ×30 倍）×1 瓶 2-8℃保存 样本处理及要求： 1.血清：室温血液自然凝固 10-20 分钟，离心 20 分钟左右 （2000-3000 转/分）。仔细收集上 清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2.血浆：应根据标本的要求选择 EDTA 、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合 10-20 分钟后， 离心 20 分钟左右 （2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再 次离心。 3.尿液：用无菌管收集，离心 20 分钟左右 （2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中 如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心 20 分钟左右 （2000-3000 转/ 分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用 PBS （PH7.2-7.4 ）稀释细胞悬液，细胞浓 度达到 100 万/ml 左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟 1 左右 （2000-