浙科版选修3第二章植物克隆.ppt

第二章 克隆技术 植物细胞杂交 第二章 克隆技术 动物细胞的培养和克隆的形成 原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。 2005年4月,美国一家非官方癌症研究中心发布信息说,“高露洁”牙膏中含有的抗菌化学物质三氯生可能是致癌物质。公众对此表示怀疑。科研人员欲采用一定的技术手段探究三氯生对人体是否有危害。请回答： 1、根据所学的动物细胞工程知识，采取下列哪种技术手段最合适 A、动物细胞融合 B、动物细胞培养 C、胚胎移植 D、核移植 动物的细胞融合技术及其应用 动物的细胞融合技术及其应用 动物的克隆繁殖 动物的克隆繁殖 细胞核移植实验和动物的克隆繁殖 两栖类细胞核移植 1981年，瑞士日内瓦大学和美国杰克逊实验室合作，首次对小鼠卵进行移核试验获得成功。 动物细胞的全能性 全能性大小比较： 受精卵胚胎干细胞 组织干细胞生殖细胞高度分化的体细胞 去核的卵细胞 乳腺细胞核 重组细胞 核移植：利用一个细胞的细胞核（供体核）来取代另一细胞中的细胞核，形成一个“合子” 细胞株：通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞 细胞株的特点：具有恒定的染色体组型、同功酶类型、病毒敏感性和生化特性等 细胞株的种类： 1、连续细胞株：可连续多次传代 2、有限细胞株：可连续次数有限 细胞系和细胞株 细胞系泛指可传代的细胞，细胞株是具有特殊性质的细胞系 动物组织培养：（P28） 动物组织在体外及人工条件下维持生活状态或生长特性。 动物细胞培养和动物组织培养： 可以统称为组织培养 获得细胞 细胞的全能性 细胞株、细胞系 植物体 培养结果 或细胞分泌蛋白 快速繁殖、培育无病毒植株等 培养目的 葡萄糖、动物血清 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 植物组织培养和动物细胞培养的比较 具 体应用 得到 动 物 组 织 培 养 胚胎或幼龄动物的脏器 单 个 细 胞 机械消化、胰蛋白酶消化 原 代 培养 培养液 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等 传代培养 大量的组织细胞(构成组织或器官) 修复受损皮肤、器官等 细胞株或细胞系 动 物 组 织 培 养 胚胎或幼龄动物的脏器 单 个 细 胞 机械消化、胰蛋白酶消化 原 代 培养 培养液 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等 传代培养 药物 研究治疗癌症的药物及其疗效 某物质 检测有毒物质、致癌物质等 细胞株或细胞系 2、根据上述选择，请你设计一个实验来探究“三氯生”对人体是否有危害。 （1）该实验的原理是 B 许多致畸物质加入动物细胞培养液后，培养细胞会发生染色体结构或数目的变异。根据变异细胞占观察培养细胞的百分数，可以判断某种物质的毒性 （2）实验方法步骤： ① 材料准备：从医院妇产科获得所需要的原始材料组织，浓度为0.09%的三氯生试剂,高倍显微镜,培养瓶若干,配置好的培养液,剪刀,培养箱,所需要的酶. ②制备检测细胞 ⅰ配置细胞悬浮液: （ ） ⅱ将细胞悬浮液分装到两个以上的培养瓶中,置于培养箱中培养一段时间. ③ 配置培养液:取两个培养瓶,分别编号1、2， （ ） 将上述组织用剪刀剪碎，再用胰蛋白酶使其分散成单个细胞，然后利用培养液配置成一定浓度的细胞悬浮液 分别往其中加入等量的配置好的培养液，再往1号瓶中滴加 几滴0.09%的“三氯生”试剂，摇匀 ④将上述某一个培养状况较好的培养瓶中的细胞培养液分成两份，分别加入1、2号培养瓶中，培养一段时间。 ⑤检测过程：分别从1、2号培养瓶中取样做多次镜检，计算出变异细胞占观察培养细胞的百分数。 ⑥预期结果和结论： a:若1号和2号培养瓶中变异细胞的百分比相当，则说明“三氯生”对人体无害。 b:若1号培养瓶中变异细胞百分数大于2号，则说明“三氯生”对人体有害。 克隆培养法（细胞克隆） ——把一个单细胞从群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个细胞群体的技术。 细胞克隆的最基本要求：克隆来源于单个细胞 细胞克隆较易成功的细胞： 无限细胞系、转化细胞系、肿瘤细胞 提高细胞克隆形成率的措施： 选择适宜的培养基、添加血清、以滋养细胞支持生长、激素刺激、使用CO2培养箱调节pH 细胞克隆的最主要用途之一： 分离缺乏特殊基因的突变细胞系 细胞融