第一章第二节　基因工程的原理和技术（共32张PPT）.ppt

本部分内容讲解结束 点此进入课件目录 按ESC键退出全屏播放 谢谢使用 * 第二节　基因工程的原理和技术 核心要点突破 情景导引 基础自主梳理 知能过关演练 第二节 近年引种的转基因抗虫棉，不仅具有抗害虫的特点，而且省药省工，节省投资，减轻环境污染，减少人畜中毒；同时还具有良好的农艺性状和经济性状。 情景导引 思考：(1)抗虫基因怎样获得？ (2)如何把抗虫基因导入棉花细胞？ 【提示】　(1)化学合成法和扩增。 (2)将抗虫基因和载体结合，组成重组DNA分子，导入棉花细胞。 基础自主梳理 一、基因工程的基本原理 1．基本原理：让人们感兴趣的基因(目的基因)在__________中稳定和高效表达。 2．基因工程的基本要素：多种_______、__________、载体和宿主细胞等。 二、基因工程的基本操作步骤 1．获得目的基因 (1)目的基因：人们所________________。如：人的胰岛素基因，植物的抗病基因等。 宿主细胞 工具酶 目的基因 需要的基因 (2)获取方法 ①如果目的基因的序列是已知的，可用化学方法合成目的基因，或者用_________________(PCR)扩增目的基因。 ②如果目的基因的核苷酸序列是未知的，可以从___________中获取。 2．形成重组DNA分子 用相同的限制性核酸内切酶分别切割目的基因和载体DNA(如质粒)，使其产生相同的__________，然后用___________将两者连接在一起，形成____________。 聚合酶链式反应 基因文库 粘性末端 DNA连接酶 重组DNA分子 思考感悟 1．基因工程中的DNA重组与减数分裂过程中的DNA重组完全相同。对吗？ 【提示】　不对。前者属于无性重组，并发生在不同种生物间，打破了物种间的界线，可以定向地改造生物的遗传特性，此操作均在细胞外进行。　 3．将重组DNA分子导入受体细胞 (1)常用的受体细胞：________、枯草杆菌、__________和动植物细胞等。 (2)导入方法举例：用质粒作为载体，宿主细胞 应该选择大肠杆菌，用_________处理大肠杆菌，增加其细胞壁的_________，使含有目的基因的重组质粒进入大肠杆菌宿主细胞。 4．筛选含有目的基因的受体细胞 (1)筛选原因：不是所有细胞都接纳了______________。 大肠杆菌 酵母菌 氯化钙 通透性 重组DNA分子 (2)筛选方法举例：由于质粒上有抗生素如四环素的抗性基因，所以含有这种重组质粒的受体细胞能够在有________的培养基中生长，而没有接纳重组DNA分子的细胞则不能在这种培养基上生长。经过培养，____________能够和质粒一起在宿主菌内大量扩增。 5．目的基因的表达 目的基因在_________中表达，产生人们需要的功能物质。 四环素 目的基因 宿主细胞 思考感悟 2．在基因工程的操作步骤中，都发生碱基互补配对。对吗？ 【提示】　不对。“重组DNA分子导入受体细胞”过程中不发生。　 核心要点突破 基因、基因文库和目的基因 1．基因：是有遗传效应的DNA片段，是控制生物性状的遗传物质的基本的结构和功能单位，基因的脱氧核苷酸序列代表遗传信息。 2．基因文库 (1)含义：是将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因。 (2)目的：获得大量的目的基因。 3．目的基因：是基因工程操作中需要的外源基因，它是编码某种蛋白质的结构基因，如生物的抗逆性基因、抗虫基因等。 例1 下列不属于获取目的基因的方法的是 (　　) A．利用DNA连接酶复制目的基因 B．化学方法合成目的基因 C．从基因文库中获取目的基因 D．利用PCR扩增目的基因 【尝试解答】　__A__ 【解析】　获取目的基因可以是化学方法合成，PCR扩增，从基因文库中提取。 【探规寻律】　DNA复制与PCR技术的比较 【提示】　(1)化学合成法。 (2)PCR技术。 DNA复制 PCR技术 场所 细胞核内 生物体外 原理 碱基互补配对 碱基互补配对 酶 DNA聚合酶、解旋酶 热稳定DNA聚合酶(Taq酶) 条件 模板、ATP、引物链、常温 模板、ATP、引物链、温度变化(90 ℃～95 ℃→55 ℃～60 ℃→70 ℃～75 ℃) 原料 四种脱氧核苷酸 四种脱氧核苷酸 特点 形成的是整个DNA分子，一个细胞周期只复制一次 短时间内形成大量DNA片段(目的基因) 形成重组DNA分子 1．目的：基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用。 2．方法 (1)用同一种限制性核酸内切酶分别切割目的基因和载体DN