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分光光度计的使用与维护方法汇
分光光度计的使用维护方法 (1)分光光度计的主要部件 光源:发出所需波长范围内的连续光谱,有足够 的光强度,稳定。 可见光区:钨灯,碘钨灯(320~2500nm) 紫外区:氢灯,氘灯(180~375nm) 单色器:将光源发出的连续光谱分解为单色光的 装置。 棱镜:玻璃350~3200nm, 石英185~4000nm 光栅:波长范围宽, 色散均匀,分辨性能好, 使用方便 吸收池:(比色皿)用于盛待测及参比溶液。 可见光区:光学玻璃池 紫外区:石英池 检测器:利用光电效应,将光能转换成 电流信号。 光电池,光电管,光电倍增管 指示器: 低档仪器:刻度显示 中高档仪器:数字显示,自动扫描记录 722型分光光度计的使用操作方法 (1)将灵敏度旋钮调整“1”档 ( 放大倍率最小) (2)开启电源,指示灯亮,仪器预热20分钟,选择开关置于T (3)打开试样室盖(光门自动关闭)调节0%T旋钮,使数字显示为00.0。 (4)将装有溶液的比色皿放置比色架中。 (5)旋动仪器波长手轮,把测试所需的波长调节至刻度线处。 (6) 盖上样品室盖,将参比溶液比色皿置于光路,调节透过率“100%T”旋钮,使数字显示为“100.0T”(如果显示不到100%T,则可适当增加灵敏度的档数,同时应重复“3”,调整仪器的“00.0”) (7)将被测溶液置于光路中,数字表上直接读出被测溶液的透过率(T)值。 (8)吸光度A的测量 参照“3”“6”调整仪器的“00.0”和“100.0”,将选择开关置于A旋动吸光度调零旋钮,使得数字显示为.000,然后移入被测溶液,显示值即为试样的吸光度A值。 (9)浓度C的测量 选择开关由A旋至C,将已标定浓度的溶液移入光路,调节浓度按钮,使得数字显示为标定值,将被测溶液移入光路,即可读出相应的浓度值 (10)仪器在使用时,应常参照本操作方法中“3”“6”进行调“00.0”和“100.0”的工作。 11)每台仪器所配套的比色皿不能与其它仪器上的比色皿单个调换。 (12)本仪器数字显示后背部,带有外接插座,可输出模拟信号 插座1脚为正,2脚为负接地线 (13)如果大幅度改变测试波长时,需等数分钟后才能正常工作。(因波长由长波向短波或短波向长波移动时,光能量变化急剧,光电管受光后响应较慢,需一段光响应平衡时间。 分光光度计的检验 波长准确度的检验 由一些原因而导致仪器灵敏度降低,影响测定结果的精度,需要经常进行检验 投射比正确度的检验 透射比的准确度最普遍是重铬酸钾溶液 稳定度的检验 吸收池配套性检验 在紫外光区测定时,需要对吸收池作校准及配对工作,以消除吸收池的误差,提高测量的准确度 维护方法 1.在不使用时不要开光源灯 如灯泡发黑(钨灯)、亮度明显减弱或不稳定,应及时更换新灯。更换后要调节好灯丝位置。不要用手直接接触窗口或灯泡,避免油污沾附,若不小心接触过,要用无水乙醇擦拭。 2.单色器是仪器的核心部分,装在密封的盒内,一般不宜拆开 要经常更换单色器盒的干燥剂,防止色散元件受潮生霉。仪器停用期间,应在样品室和塑料仪器罩内放置数袋防潮硅胶,以免灯室受潮,反射镜面有霉点及沾污。 3.吸收池在使用后应立即洗净,为防止其光学窗面被擦伤,必须用擦镜纸或柔软的棉织物擦去水分 生物样品、胶体或其它在池窗上形成薄膜的物质要用适当的溶剂洗涤。有色物质污染,可用3mol/L 盐酸和等体积乙醇的混合液洗涤 4.光电器件应避免强光照射或受潮积尘 ?5.仪器的工作电源一般允许220V±10%的电压波动 为保持光源灯和检测系统的稳定性,在电源电压波动较大的实验室最好配备稳压器。 多通道仪器(Multichannel Instruments) 光电二极管阵列(通常具有316个硅二极管) photodiode arrays (PDAs) 同时测量200~820nm范围内的整个光谱, 比单个检测器快316倍,信噪比增加 316 1/2 倍. 小组成员 梁升楚,邓飞宇,王少波,周润添,谢雄,陈茂阳,李伟豪,吴敏儿,陆伟强 * * 光源 单色器 吸收池 检测系统 稳压电源 通过棱镜或光栅得到一束近似的单色光. 波长可调, 故选择性好, 准确度高. 分光光度法的主要部件框架 (2)分光光度计的类型 722型分光光度计结构方框图 光源 吸收池 检测系统 分光系统 721分光光度计 其它类型分光光度计 将光度计放入样品中, 原位测量. 对环境和过程监测非常重要. 纤维光度计 镀铝反射镜 纤维光度计示意图 纤维光度计
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