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官方说明书R
/file/2415598
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FMDV
FMDV
牛口蹄疫病毒(FFMMDDVV)酶联免疫分析(ELISA)
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
药品名称:
通用名:牛口蹄疫病毒(FMDV)酶联免疫分析试剂盒
使用目的:
本试剂盒用于测定牛血清、血浆、或其它组织液中口蹄疫病毒(FMDV)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛口蹄疫病毒(FMDV)水平。用纯化的牛口蹄疫病毒(FMDV)
抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入口蹄疫病毒(FMDV),再与HRP 标记的
FMDV 抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的
催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的牛口蹄疫病毒(FMDV)
呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中牛口蹄疫病毒(FMDV)
浓度。
试剂盒组成
1 20倍浓缩洗涤液 30ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶
2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品(450ng/L) 0.5ml×1瓶
3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶
4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份
5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张
6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个
标本要求
1.标本采集后尽早进行实验。
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
3.可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
操作步骤
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然
后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三
孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl
弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;
混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释
液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀
释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为(300ng/L,
200ng/L ,100ng/L,50ng/L,25ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步
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