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官方说明书Salusin-酶联免疫吸附测定试剂盒 使用说明书
Salusin elisa immune elisa kit Manual
/file/1903647
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人Salusin-β酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!
预期应用
ELISA法定量测定小鼠血清、血浆或其它相关生物液体中Salusin-β含量。
实验原理
用纯化的Salusin-β抗体包被微孔板,制成固相载体,往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的Salusin-β
抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物(TMB)显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝
色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的Salusin-β呈正相关。用酶标仪在450nm波
长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制
1、 酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15 分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至1ml,盖好后室温静置
大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为10 ng/ml,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板
中进行倍比稀释),分别配制成10 ng/ml,5ng/ml,2.5ng/ml,1.25ng/ml,0.625ng/ml,0.312ng/ml,0.156 ng/ ml,
样品稀释液直接作为空白孔 0ng/ml。如配制5ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml )10ng/ml的上
述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
6、 检测溶液A:1×120 /瓶(1:100)。临用前以检测稀释液A1:100稀释(如:10 检测溶液A/ 990 检
测稀释液A),充分混匀,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100/孔),实际配制时应
多配制 0.1-0.2ml。
7、 检测溶液B:1×120 /瓶(1:100)。临用前以检测稀释液B1:100 稀释。稀释方法同检测溶液A。
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8、 底物溶液:1×10ml/瓶。
9、 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液:1×10ml/瓶(2mol/LH2SO4)。
11、覆膜:5张
12、使用说明书:1份
自备物品
1、 酶标仪(建议仪器使用前提前预热)
2、 微量加液器及吸头,EP管
3、 蒸馏水或去离子水,滤纸
标本的采集及保存
1、 血清:全血标本请于室温放置2小时或4 过夜后于1000 g离心20 分钟,取上清即可检测,或将上清
置于-20 或-80 保存,但应避免反复冻融。
2、 血浆:可用EDTA 或肝素作为抗凝剂,标本采集后30 分钟内于
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