官方说明书大鼠糖胺聚糖(GAG)ELISA 试剂盒使用说明书.pdfVIP

rat Glycosaminoglycans Gather Sugar (GAG)ELISA kit Manual /file/2415354 From ManualL ManualL collects and classifies the global product instrunction manuals to help users access anytime and anywhere, helping users make better use of products. Home: / Chinese: / This Manual: /file/2415354 大鼠糖胺聚糖(GAG)ELISA 试剂盒使用说明书 产品编号：E1850r 本试剂盒仅供体外研究使用! 预期应用 ELISA 法定量测定大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养物上清或其它相关液体中 GAG 含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中 GAG 水平。用纯化的抗体包被微孔 板，制成固相抗体，往包被有固相抗体的微孔中依次加入GAG 抗原、生物素化的抗GAG 抗体、 HRP 标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB 显色。TMB 在过氧化物酶的催化下转化成 色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 GAG 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。 试剂盒组成及试剂配制 1. 酶联板：一块（96 孔） 2. 标准品 （冻干品）：2 瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml ，盖好后静置10 分钟以上， 然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为 100 ng/mL，做系列倍比稀释后，分别稀释成 100 ng/mL，50 ng/mL ，25 ng/mL ，12.5 ng/mL，6.25 ng/mL，3.12 ng/mL，1.56 ng/mL，其原液 直接作为最高标准浓度，样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/mL ，临用前15 分钟内配制。 如配制50 ng/mL 标准品：取0.5ml 100 ng/mL 的上述标准品加入含有0.5ml 样品稀释液的 Eppendorf 管中，混匀即可，其余浓度以此类推。 3. 样品稀释液：1×20ml/瓶。 4. 检测稀释液A ：1×10ml/瓶。 5. 检测稀释液B ：1×10ml/瓶。 6. 检测溶液A ：1×120ul/瓶（1：100）临用前以检测稀释液A 1：100 稀释，稀释前根据预先 计算好的每次实验所需的总量配制 （每孔 100ul ），实际配制时应多配制 0.1-0.2ml 。如 1ul 检测溶液A 加99ul 检测稀释液A 的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。 7. 检测溶液B ：1×120ul/瓶（1：100）临用前以检测稀释液B 1：100 稀释。稀释方法同检测 溶液A 。 8. 底物溶液：1×10ml/瓶。 9. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25 倍。 10. 终止液：1×10ml/瓶（2N H SO ）。