第七章层析分离技术（）——反相资料.pptVIP

第七章 层析分离技术（7） 本章内容 7.1 层析技术导论 7.2 凝胶过滤层析 7.3 离子交换层析 7.4 亲和层析 7.5 固定金属离子亲和层析 7.6 疏水作用层析 7.7 反相层析 * 7.7 反相层析 一、基本原理 二、反相介质的种类 三、特点及用途 四、影响因素 五、高效液相色谱简介 * 7.7 反相层析一、基本原理 反相层析（Reversed-phase chromatography, RPC）利用非极性的反相介质为固定相，极性有机溶剂的水溶液为流动相，是根据溶质极性（疏水性）的差异进行分离纯化的层析技术。 反相层析属于分配层析，溶质在固定相（非极性介质）和流动相之间的分配系数取决于溶质的疏水性： 溶质的疏水性越大，其在固定相中的分配系数越大。 烃类化合物的分配系数与其分子所含碳原子数成正比。 当固定相一定时，可通过调节流动相的组成来调整溶质的分配系数。 流动相的极性越大，溶质的分配系数越大。 因此，RPC多采用降低流动相极性（水含量）的线性梯度洗脱法。 * 7.7 反相层析二、反相介质的种类 反相介质的商品种类繁多，其中最具代表性的是以硅胶为载体，通过硅烷化反应在硅胶表面键和非极性分子层。硅烷化反应式如下： 其中，硅烷化试剂中R1和R2多为甲基，R为C4、C8、C18烷基或苯基，一般简称为C4、C8、C18柱等 另外，高分子聚合物也可作为反相介质，如：