第七章层析分离技术（）——疏水作用资料.pptVIP

第七章 层析分离技术（6） 本章内容 7.1 层析技术导论 7.2 凝胶过滤层析 7.3 离子交换层析 7.4 亲和层析 7.5 固定金属离子亲和层析 7.6 疏水作用层析 7.7 反相层析 * 7.6 疏水作用层析 一、原理与特点 二、疏水性吸附剂 三、影响疏水性吸附的因素 四、疏水作用层析的操作要点 * 7.6 疏水作用层析一、原理与特点 疏水性作用色谱（Hydrophobic interaction chromatography, HIC）是利用表面偶联疏水性基团（疏水性配基）的疏水性吸附剂为固定相，根据蛋白质与疏水性吸附剂之间的疏水性相互作用的差异进行蛋白质类生物大分子分离纯化的层析技术。 蛋白质分子中具有疏水基团和亲水基团； 在水溶液中，尽管大部分疏水基团被折叠在分子内部，表面为极性和荷电基团，但总有一些疏水性基团或极性基团的疏水部位暴露在蛋白质表面； 根据蛋白质“盐析沉淀原理”，在离子强度较高的盐溶液中，蛋白质表面疏水部位的水化层被破坏，暴露出疏水部位，疏水性相互作用增大； 因此，在疏水作用色谱中在样品吸附阶段采用高盐浓度的溶液使目标分子结合在层析柱中，而在洗脱阶段采用降低洗脱剂中盐浓度的方式减弱这种疏水作用力，从而解吸溶质达到洗脱的目的。 1. 原理 * 7.6 疏水作用层析一、原理与特点 疏水性作用层析（HIC）主要用于蛋白质类大分子的分离纯化。虽然HIC