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卡介苗治疗肿瘤的论文（共2篇）_肿瘤学论文 第1篇：肿瘤中卡介苗药物治疗的方法 膀胱肿瘤是泌尿系统中最常见的肿瘤，90%以上为移行上皮细胞癌，大部分为浅表性膀胱癌,除了用手术治疗以外，还须辅以抗肿瘤药物膀胱内灌注治疗，但有一定的复发率和应用药物的副作用，其中卡介苗是主要的治疗药物。本研究采用MNU膀胱灌注诱导建立大鼠膀胱肿瘤模型，用塞来昔布和卡介苗单独和联合用药，评价其疗效，以寻求更安全有效的膀胱肿瘤药物联合治疗方法。 1材料与方法 1.1材料实验动物及主要试剂5～6周龄Wistar雌性大鼠，由河北医科大学实验动物中心提供；MNU由美国Sigma公司生产；冻干卡介苗购自上海生物制品研究所；塞来昔布由美国辉瑞公司生产。 试剂的配制MNU溶液：用pH6.0的0.1mol/L枸橼酸缓冲液为溶剂，将MUN配成浓度为20mg/ml的溶液，每只大鼠用量0.1ml。BCG溶液：50mg/支冻干卡介苗溶于5ml生理盐水中，每只大鼠用量0.1ml。塞来昔布:每只大鼠用量100mg/kg，按大鼠体重确定其用量，溶于2ml生理盐水中。 1.2方法膀胱肿瘤大鼠模型的制备40只大鼠造模过程：灌注前腹腔内注射0.6%的戊巴比妥钠麻醉动物，剂量为2.5ml/kg。起效后仰卧固定，0.1%的碘伏消毒尿道外口后，用5cm硬膜外导管导尿排空膀胱后，接上带有6号半针头的1ml注射器按计划向膀胱内注入0.1mlMNU溶液，每2周1次，共5次。 分组及处理于第10周，将40只大鼠随机分为4组：PBS组，塞来昔布组、卡介苗组、塞来昔布+卡介苗组，每组10只。开始给予药物干预治疗，分别给予0.1mlPBS、100mg/kg塞来昔布、0.1ml卡介苗、100mg/kg塞来昔布+0.1ml卡介苗，PBS与卡介苗采用膀胱灌注给药，每周1次，共3次，塞来昔布采用灌胃给药，每天1次，共3周。 1.3标本处理病理切片观察：于第13周采用断颈法处死大鼠，解剖膀胱，完整切取膀胱，于膀胱前壁剖开，观察膀胱内表面及肿瘤形成的大体情况；在病变明显处切取部分肿瘤组织，置于中性福尔马林溶液中固定24h，常规石蜡包埋，4μm切片，HE染色，显微镜下观察。 1.4免疫状态检测：用免疫组化法分别检测切片中肿瘤组织中CD3+、CD4+、CD8+的表达量；TUNEL法检测肿瘤组织细胞的AI值。 统计学处理数据用x±s表示，所有实验数据均采用SPSS11.5软件进行处理,用SNK法进行多个样本均数的方差分析，以α=0.05作为检验水准。 2结果 诱发膀胱肿瘤情况解剖切开膀胱发现膀胱壁增厚、苍白、菜花状新生物形成，绝大多数为多发肿瘤。HE染色结果:移行上皮结构特征部分消失，呈弥漫分布或排列成实体性癌灶。细胞异形明显，表现为细胞大小不一，排列紊乱，极向消失，核畸形，核浆比例大，核分裂像明显。 每个视野计数100个细胞，计数3个视野，计算阳性细胞数占细胞总数的百分率。其余3组CD3+、CD4+、CD8+细胞的浸润百分比与PBS组相比，差异均有统计学意义（P 0.05）。联合用药组与卡介苗组及塞来昔布组比较，免疫细胞浸润更明显（P 0.05），联合用药可以增强免疫细胞在肿瘤组织局部的作用。 各组均出现不同程度的肿瘤细胞核呈棕褐色染色。其他实验组AI均明显高于PBS组（P 0.05）。且联合用药组与卡介苗组及塞来昔布组比较凋亡更明显，差异有统计学意义（P 0.05）。 3讨论 研究发现，以卡介苗为基础的联合灌注治疗能够明显地延长膀胱癌患者的总体生存时间。卡介苗发挥抗癌作用的主要方式是通过激活免疫系统而发挥作用[1]。 近期研究表明,在浅表性膀胱癌和人类其他肿瘤的癌组织和细胞系中检测到COX-2蛋白及分子水平都有高表达[2-4]。COX-2诱导产生的PGE2分泌增加与机体免疫抑制相关，PGE2能降低机体的抗肿瘤免疫而促进肿瘤的生长[5]。研究认为，塞来昔布抗肿瘤效应主要是通过降低PGE2水平从而增强免疫系统的功能来起作用的。 研究表明，在BCG激活的膀胱肿瘤局部免疫中，CD4+T细胞在膀胱黏膜下层的浸润是最重要的，CD4+T细胞的表达量直接关系到BCG激活的免疫系统的效能[6]。本实验结果显示，联合用药组CD3+、CD4+T细胞比单独用药组有显着的增长，其差别有统计学意义。本研究中，CD8+T细胞的表达量用药组比PBS组均减小，联合用药组减少更显着。研究表明，CD8+T细胞在用药治疗早期是升高的，但是治疗后期会下降，这与大量的CD8+T细胞作用于肿瘤细胞，杀伤肿瘤细胞的同时，自身也崩解、凋亡有关。塞来昔布组与PBS组比较，肿瘤免疫细胞的表达量的差异无统计学意义，这说明在无BC