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一. 原理和技术 1. 吸样、连续稀释系统 2. AcV 技术-细胞化学光吸收和体积分析 3. DFF - 流式双聚焦系统 4. 库尔特原理 1. 吸样、连续稀释系统 连续稀释系统 白细胞亚群 白细胞可以分为5个亚群： 中性粒细胞 淋巴细胞 单核细胞 嗜酸细胞 嗜碱细胞 2. AcV技术- 细胞化学光吸收和体积分析 3. DFF- 流式双聚焦通道 4. 嗜碱细胞分类、白细胞计数 二. 参数推导 二. 参数推导 1. 分类参数 2. 白细胞/嗜碱细胞参数 3. 红细胞/血小板参数 4. 血红蛋白 1. 分类参数 细胞化学光吸收和体积分析 (AcV) 2. 白细胞计数和嗜碱细胞分类 3. 红细胞和血小板参数 4. HGB参数推导 5. 常见旗标和信息 常见旗标 不一致： ‘V’ WBC 3.0 x103/μL 9% 3.0 x103/μL 7% RBC - 8% Hct - 5% Plt 100.0 x103/μL 20% 100.0 x103/μL 15% Hgb 结果读取错误：三次结果读取不一致 常见旗标 超出仪器可报告范围：‘+++++’ WBC 100 x103/μL RBC 10 x106/μL Hgb 30 g/dL Plt 1500 x103/μL Hct 80% MCV 199fL 如果低于仪器报告下限，则报告为0 常见旗标 不完全计算： ‘……’ WBC 90 x103/μL时分类参数#显示； 如果连续3次血红蛋白空白错误，则第三个样本的HGB、MCH、MCHC结果替换为“…..”； 中性粒细胞和嗜酸细胞群区分报警； 中性粒细胞和单核细胞群区分报警。 常见旗标 复核： ‘R’ 血红蛋白空白错误，血红蛋白参考空白值与样本空白值的差值超过容许范围，则HGB、MCH、MCHC结果加上旗标“R”； 白细胞分类报警； 白细胞分类不能接受； 血小板结果不能接受。 超出线性范围： ‘+’ WBC 90 ，100 x103/μL RBC 7.50 ，10.00 x106/μL Hgb 23.0 ，30.0g/dL Plt 1000.0 ，1500.0 x103/μL 常见旗标 白细胞计数旗标： DIFF-：表示流式通道得到的白细胞结果小于白细胞/嗜碱细胞池中得到的结果； DIFF+：表示流式通道得到的白细胞结果大于白细胞/嗜碱细胞池中得到的结果； 常见的解释性信息 LEUCOCYTOSIS：白细胞增多 LYMPHOCYTOSIS：淋巴细胞增多 LYMPHOPENIA：淋巴细胞减少 LARGE IMMATURE CELLS：大数量的幼稚细胞 ATYPICAL LYMPHOCYTE：异型淋巴细胞 MYELEMIA：髓细胞性白血病，当中性粒细胞百分比高于上限，且幼稚细胞高于上限 常见的解释性信息 BLASTS：原始细胞，当嗜碱细胞结果高于上限，且幼稚细胞高于上限，且出现UM旗标 ANEMIA：贫血，血红蛋白低 ANISOCYTOSIS：红细胞大小不一，RDW 高于上限 HYPOCHROMA：血红蛋白含量低，MCH低于下限 COLD AGGLUTININ：冷凝集，MCMC高于上限 SCHISTOCYTE：裂细胞，由血小板直方图推导出 PLT AGGREGATES：血小板聚集，当血小板150且白细胞结果出现“V”时出现，或PDW 20、MPV10 6. 血红蛋白检测 冲洗池 分类池 红细胞/血小板池 白细胞/嗜碱细胞池 预稀释/血 红蛋白池 比色测定血红蛋白量 改良氰化高铁血红蛋白法 INDEX MAINMENU INDEX MAINMENU 白细胞分类的稀释 稀释比例 1：80 25μL样本 +1000μL分类试剂 + 1000μL稀释液 稀释比例= 1：80 白细胞分类试剂溶解红细胞， 稳定白细胞于原始状态， 将细胞染成不同颜色， 嗜酸细胞染色程度最深。 作用12 秒后加入稀释液终止反应， 输送到流式通道进行分析。 分类池 钨灯光源 流式通道 无细胞 无吸收/光散射 基线 小细胞 低吸收/光散射 低信号(如淋巴细胞) 粒细胞 高吸收/光散射 中等信号(如中性粒细胞) 重度染色粒细胞 极高吸收/光散射 大信号(如嗜酸细胞) 检测器 光吸收值 细胞定位： 光吸收 体积 碎片 淋巴细胞 嗜酸细胞 单核细胞 中性粒细胞 IMM(未成熟粒细胞) ATL(异型淋巴细胞) 淋巴细胞 淋巴细胞形态小而规则，体积小，与其他细胞相比吸光率低，位于分类点图的下方。 细胞特征 光吸收 体积 碎片 淋巴细胞 嗜酸细胞 单核细胞 中性粒细胞 IMM(未成熟粒细胞) ATL(异型淋巴细胞) 单核细