维生素C测定 中山大学公共卫生学院.pptVIP

实验室注意事项 穿白大褂 注意实验室安全 有问题及时告知老师 实验完成后收拾台面，保持整洁 班长负责安排实验分组(6组)和值日(4组) 水溶C100营养成分 445ml水溶C100含： 热量 710kj 碳水化合物 42g、蛋白质0g、脂肪0g 维生素C 100mg 实验目的 了解营养评价中实验室检查的意义 了解食物中还原型维生素C测定方法 实验步骤 1. 用标准维生素C溶液标定2, 6-二氯酚靛酚染料 2. 用标定后的2, 6-二氯酚靛酚染料滴定样品，测得其还原型维生素C的浓度 溶液（均已配制） （1） 1%草酸溶液：1g草酸充分溶解后，转移至100ml量筒中，加蒸馏水至100ml刻度，搅匀备用 （2）0.1%维生素C标准母液（1mg/ml）：取1g标准维生素C，溶于100ml 1%草酸中，冰箱保存待用 （3）水溶C100饮料稀释液：市售水溶C100饮料冰箱待用。使用前用1%草酸溶液稀释20倍 （4）0.02% 2,6-二氯酚靛酚：50mg二氯酚靛酚溶解于200ml NaHCO3(0.2g/ml)热溶液中，4℃过夜，过滤后装于棕色瓶中，用蒸馏水定容250ml，冰箱保存备用 1. 标准维生素C溶液标定2,6-二氯酚靛酚染料 实验步骤 计算 2. 用标定后的2, 6-二氯酚靛酚染料滴定待测样品 样品中维生素C浓度的计算 注意事项 1. 整个滴定过程要迅速，防止还原型维生素C被氧化。滴定过程一般不超过2min 2. 由于滴定结果较小，因此在滴定开始时，染料加入速度不能过快，而后尽可能一滴一滴缓慢地加入，并不断地摇动三角烧瓶 3. 样品中可能含有其它还原性物质，均可与2,6-二氯酚靛酚反应，但反应速度较维生素C慢，故滴定时以15s内淡粉红色不褪去为止 4. 试剂溶液的保存 维生素C标准品粉末：棕色干燥皿内保存 维生素C标准溶液与2, 6-二氯酚靛酚染料：棕色瓶、短期冷藏 实验报告 实验报告的书写内容要统一，包括 实验题目 实验目的 实验原理 实验结果 讨论 不需要写实验步骤 实验课成绩占总成绩的10% 班长收齐作业,交到公共卫生学院915室（6月3日前） * 水溶C100饮料中还原型维生素C含量的测定 ----2,6-二氯酚靛酚滴定法 邓棋霏公共卫生学院dengqf3@mail.sysu.edu.cn 维生素C推荐摄入量（RNI）：成人100mg/d 实验原理——2, 6-二氯酚靛酚滴定法 维生素C含有-OH基，具有较强的还原性，能还原2, 6-二氯酚靛酚染料 2, 6-二氯酚靛酚在中性或碱性溶液中呈蓝色，在酸性溶液中呈红色，被还原后为无色 一瓶水溶C100真的能够满足每日所需维生素C？？ 实验原理——2, 6-二氯酚靛酚滴定法 当溶液由无色变为微红色时即表示溶液中的维生素C刚好全部被氧化，此时即为滴定终点。根据滴定时2,6-二氯酚靛酚溶液的消耗量，可计算出食物溶液中还原型维生素C的含量 酸性 2,6-二氯酚靛酚(蓝色)+ 维生素C 脱氢维生素C + 还原型2,6-二氯酚靛酚(无色) 酸性 2,6-二氯酚靛酚(蓝色) 2,6-二氯酚靛酚(红色) 配制Vc标准应用液（1mg/50ml） 标定二氯酚靛酚 （两次） 5ml Vc标准应用液 二氯酚靛酚染料滴定 无色变淡粉红色，保持15秒不褪色 所用染料A1和A2 ml，计算均值A ml 空白试验 （两次） 10ml 1%草酸 记录结果C1和C2 ml，计算均值C ml 1ml 0.1% Vc标准母液 加1%草酸至刻度 摇匀 5ml 1%草酸 混匀 50ml容量瓶 T = 0.1 (A-C) 1ml染料相当于还原型维生素C T mg 标定二氯酚靛酚染料时所用的维生素C量 二氯酚靛酚染料滴定 无色变淡粉红色，保持15秒不褪色 饮料稀释液VC浓度测定 （两次） 5ml饮料稀释液 记录结果B1和B2 ml，计算均值B ml 5ml 1%草酸 混匀 实验步骤 水溶C100饮料维生素C浓度(mg/ml) = （B-C）× T 5 ml × 20