e-钙粘蛋白基因启动子区异常甲基化与子宫中肌瘤的关联研究-妇产科学专业论文.docxVIP

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e-钙粘蛋白基因启动子区异常甲基化与子宫中肌瘤的关联研究-妇产科学专业论文.docx

优秀毕业论文 精品参考文献资料 河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 本学位论文在导师(或指导小组)的指导下,由本人独立完成。本学 位论文研究所获的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。河北医科 大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内 容相关的论文,第一署名单位为河北医科大学,试验材料、原始数据、申 报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则,承担相应的法律责任。 研究生签名:冉冉 导师签章: 二级学院领导签章: ,』 l口心年弓月7孑J日 河北医科大学研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了文中 特别加以标注和致谢等内容外,文中不包含其他人已经发表或撰写的研究 成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写,文责自负。 研究生签名: 茂蕊 导师签章: 】od年3月刍旧 万方数据 目 录 中文摘要 】 英文摘要 .4 英文缩写 7 研究论文E.钙粘蛋白基因启动子区异常甲基化与子宫肌瘤的关联研究 —L上.—L 日U舌 ’ 。 - 8 材料与方法 9 结果 .15 附图 .17 附表 .19 讨{会 .21 结{仑 .24 参考文献 .25 综述子宫肌瘤及其相关遗传 ·29 致谢 .45 个人简历 .46 万方数据 中文摘要 E.钙粘蛋白基因启动子区异常甲基化与子宫肌瘤的关联研究 摘 要 目的:子宫肌瘤是妇女在生育年龄最常见的肿瘤,其发生率约为20--- 30%。虽然子宫肌瘤是良性肿瘤,但是它可以导致女性月经出血过多、慢 性盆腔痛、反复流产、不孕等。子宫肌瘤的确切发病机制到目前仍不清楚。 有研究表明子宫肌瘤的发生和发展与一些肿瘤抑制基因的异常表达相关, 例如:T—cadherin、p53、KLFl 1、DLECl和KRTl9等。肿瘤抑制基因 的失活或者功能缺失可能是形成子宫肌瘤的原因之一。 E.钙粘蛋白是一个重要的肿瘤抑制基因,属于细胞表面糖蛋白家族中 的一员,它可以维持同质细胞间的粘附和保持组织结构的完整性。大量研 究表明,E.钙粘蛋白的异常表达与许多上皮性肿瘤的侵袭和转移有关,包 括子宫内膜癌、子宫颈癌、卵巢癌和肉瘤等。另外,E.钙粘蛋白的异常表 达在一些良性侵袭性疾病的发生和发展中也起着重要作用。如:E.钙粘蛋 白表达的缺失是子宫内膜异位症中异位内膜转移的先决条件。有关E一钙 粘蛋白与子宫肌瘤的研究还少有报道,Matsuzaki等发现患有子宫肌瘤的 不孕妇女的分泌中期内膜E一钙粘蛋白表达明显升高。 E一钙粘蛋白的异常表达与E.钙粘蛋白基因(CDHl)基因突变、等位 基因的缺失以及基因启动子区甲基化有关。积累的研究表明CDHl基因 启动子区甲基化是导致其在肿瘤中转录失活的重要分子机制。甲基化对启 动子区的活性有明显的降低作用,进而可以导致E.钙粘蛋白表达下调甚 至失活,从而引起肿瘤的发生、侵袭和转移。 本研究拟在探讨CDHl基因启动子区甲基化与子宫肌瘤发病的关系, 目的在于从表观遗传学上更为深入地探究子宫肌瘤的发病机制,也为临床 上治疗该疾病提供新的靶点。 方法: 1标本采集:病例组:取自2014.1月_2014.8月在河北医科大学第四医 院妇科因子宫肌瘤就诊并接受手术的患者102例,患者的年龄段为3 1~ 58岁(平均年龄47.67士4.51岁)。术后经病理证实均为子宫肌瘤,无恶变。 对照组:收集在河北医科大学第四医院同期因宫颈上皮内瘤变III级 万方数据 中文摘要 (CINIII级)就诊并接受手术治疗的患者50例,其年龄段为26~55岁(平 均年龄44.90+8.49岁)。均经病理证实是正常子宫内膜组织。以上标本收 集均在经过患者知情同意后进行。 2实验步骤 2.1标本处理:病例组与对照组标本离体后,即刻浸泡在事先准备好的 RNA later液中,并马上转移到4。C冰箱中过夜,然后放在一20℃冰箱中贮 存以备用。 2.2 DNA提取:将病例组与对照组组织标本各取出50.100mg,分别进行 组织研磨,提取组织DNA。 2.3 E.钙粘蛋白基因启动子区甲基化状态的检测:利用甲基化特异性PCR 技术(MSP)检测所有标本的组织DNA中的甲基化情况,分别计算两组 的甲基化率。 2.4 E.钙粘蛋白表达水平的检测:应用流式细胞术分别检测甲基化阳性和 甲基化阴性的组织标本中E.钙粘蛋白的表达情况。 2.5数据分析:实验数据使用SPSS软件进行分析。 结果: 1比较病例组与对照组中CDHl基因启动子区的甲基化情况 在子宫肌瘤的内膜组织和正常子宫的内膜组织中,CDHl基因的甲基 化率分别是33.3%(34/102)和8%(4/50 o与正常内膜组织相比,子宫 肌瘤的内膜组织中CDHl基因甲基化率明显升高(P=-0.001)

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