实验二 植物染色体组型分析.pptVIP

实验二 植物染色体组型分析 一、实验目的 1. 学习染色体组型分析的方法。 2. 了解染色体组型分析的意义。 二、实验原理 各种生物染色体的形态、结构和数目都是相对稳定的。每一种生物细胞内特定的染色体组成，叫做染色体组型。染色体组型分析也称核型分析，就是通过对染色体标本和其照片进行测量、对比分析、配对、分组、排列，对组内各染色体的形态进行测量、描述，从而阐明生物染色体组成的过程。 在植物根尖等分生组织中的细胞有丝分裂中期，染色体具有较为典型的特征，且易于计数，因而染色体组型分析都以这一分裂时期进行观测。在染色体组型分析时，染色体制片要求很严格，需要分裂相多，染色体分散，互不重叠，能清楚显示着丝点位置。测量放大照片上的每个染色体，根据染色体的长度和其它形态特征，依次配对排列、编号，并对各染色体的形态特征作出描述。 组型分析通常包括两方面的内容：① 确定一物种的染色体数目; ② 辨析每条染色体的特征。一般采用分散良好的、形态清楚而典型的有丝分裂中期的染色体标本来完成这项工作。 组型分析有传统的方法和现代利用计算机技术进行分析两种方法。 经典的核型分析方法较耗时，自20世纪60年代起，人们开始将图像处理技术应用于核型分析中。目前已实现计算机自动检测染色体分散良好的中期细胞，并自动完成核型分析。但这样的软件价格高昂。 Adobe Photoshop是一款流行的功能强大的图像处理软件，它较专门的核型分析软件容易获得，用这款软件，可以容易的完成染色体的排列、测量工作。同时还具备传统方法不具备的许多功能，如去除原照片中的斑点、划痕、调整对比度、亮度等，使分析结果比较完美。 三、实验材料、器具 分散良好的野生二棱白皮大麦（2n＝14）的中期细胞的显微照片 剪刀、计算器、胶水、尺子（最小刻度：1mm） 野生二棱白皮大麦中期染色体图 四、实验步骤 1、测量 测量每条染色体的总长度及长臂长度和短臂长度。测量后，先在每条染色体旁边用笔作临时标记。随体的长度可以计入也可不计入染色体长度之内 ，每条染色体的着丝粒应平分为二，计入两臂长度之内。 染色体弯曲不能用直尺测量时，可以先用细线量取与染色体等长的长度，再用尺子量出线的相应长度。通常以mm为单位。 2、计算 3、配对 根据测量数据，比较染色体的性状、大小、相对长度、臂比、着丝粒指数、副缢痕的有无及位置、随体的有无等特征，对照片上的染色体进行粗剪（即将各个染色体分别剪下）和同源染色体的配对。 4、排列 将配对的染色体按由大到小的顺序进行排列并编号。对于等长的染色体，以短臂长的在前；有特殊标记（如随体）的染色体及性染色体排在后面。排列时，把各对染色体的着丝粒排在一条直线上。短臂在上，长臂在下。 5、分类 臂比值实际上反映的是着丝粒的位置，这个位置在一条染色体中是相对固定的，因而是描述染色体特征的最有用的指标。 6、剪切 将已经粗剪过的每条染色体进行细剪，使染色体周围所留相纸相等，若染色体图像清晰可以不留余边，然后按排列顺序整齐的粘在白纸上。 核型分析表 五、实验报告 实验内容 结果与分析 1. 染色体核型图 2. 核型分析表 附：用Adobe Photoshop进行核型分析 1、图像来源：一是选择染色体分散良好的有丝分裂中期的细胞，用数码相机拍摄（100万像素），然后输入电脑；另一个是利用传统方式拍摄，然后用扫描仪将图像扫描进计算机内。可视图像情况适当调整对比度、亮度；去除斑点、划痕等，使图像更适于分析。 2、据目测，对染色体大致归拢，根据染色体较明显的特征（如最短、最长、随体等）进行同源染色体的配对。根据测量结果在对配对错误的染色体进行调整。 配对过程中主要使用套索（Lasso）与自由变形（Free transform）两个工具即可。 3、测量每条染色体的总长与臂长，调整配对错误的染色体。根据网格线表示准确测量每条染色体的长度及相应的臂长。 4、核型图做完后，还可利用文字工具（type tool）在土的下方对核型图作些说明。，最或将结果打印出来。 * * * 染 色 体 形 态 结 构 注意：总染色体长度为一套单倍体染色体长度的总和。 6 7 5 4 3 2 1 着丝粒类型 臂比值 短臂长度 长臂长度 相对长度 序号 总长度＝