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et1引起热痛觉过敏与瘙痒机制研究word格式论文.docx

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et1引起热痛觉过敏与瘙痒机制研究word格式论文

学位论文原创性声明本论文是我个人在导师指导下进行的工作研究及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外,不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体,均已在论文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律责任由本人承担。作者签名:日期:年月日学位论文使用授权声明本人授权汕头大学保存本学位论文的电子和纸质文档,允许论文被查阅和借阅;学校可将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其它复制手段保存和汇编论文;学校可以向国家有关部门或机构送交论文并授权其保存、借阅或上网公布本学位论文的全部或部分内容。对于保密的论文,按照保密的有关规定和程序处理。作者签名:导师签名:日期:年月日日期:年月日学位论文知识产权声明本人在就读研究生期间所完成的学位论文以及相关结果,知识产权归属汕头大学医学院。本人在毕业离校前会将有关的研究资料和结果全部上交导师,离校后发表或使用学位论文或与学位论文直接相关的学术论文或成果时,须征得导师及导师所在单位的同意,并要求署名单位仍为汕头大学医学院。本人不得以本论文的研究成果申报研究课题。导师和导师单位可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段进行保存、汇编学位论文,可以公布(包括刊登)论文的全部或部分内容。导师及导师所在单位享有发表学位论文、申请成果和专利的权利。注:保密的学位论文在解密后适用本声明。研究生签名:日期:年月日导师签名:日期:年月日中文摘要目的:ET-1(endothelin-1, ET-1)是1988 年日本学者从猪主动脉内皮细胞中发现的一种具有强烈收缩血管的多肽。ET-1通过作用在G蛋白偶联受体(Gproteincoupledreceptor,GPCR)发挥作用,即ETA和ETB受体。ET-1皮下注射引起热痛觉过敏和瘙痒,两者是否通过相同还是不同初级神经纤维传入,目前仍不明确。我们使用大鼠作为实验对象,探讨ET-1 引起热痛觉过敏和瘙痒分子机制及其可能存在的联系。激活的ETB受体通过κ受体和NOS(nitricoxide synthase)发挥镇痛、止痒过程,而皮肤本身存在这些受体,通过激活皮肤细胞这些受体后检测一氧化氮(nitriteoxide,NO)分泌量确定是否具有自分泌抗伤害作用。方法:选择雄性SD大鼠,体重180-220g,分组处理,每组6-9 只大鼠,每只实验大鼠只使用一次。采用大鼠足底和脸颊皮下注射ET-1(10 μM)分别诱导产生热痛觉过敏和瘙痒,通过与PKC抑制剂Bisindolylmaleimide Ⅰ(BIM)、PLC抑制剂U73122、PC-PLC抑制剂D609、PKA抑制剂H89和非选择性NOS抑制剂L-NAME 共同注射探索它们的传导通路。培养的人角质形成细胞经过ETB和κ受体激动剂处理后检测产生NO量。结果:1 ET-1 引起热痛觉过敏作用足底注射ET-1 可明显降低热痛觉敏感阈值。ETA受体特异性拮抗剂BQ123与ET-1 共同足底注射能完全阻断ET-1引起的热痛觉过敏(P0.01),而ETB受体特异性拮抗剂BQ788(1mM)对热痛觉阈值没有影响(P 0.05)。PLC 抑制剂U73122、PKC 抑制剂BIM与ET-1 共同注射后显著抑制ET-1 引起的热痛阈的降低(P0.01)。而PC-PLC 抑制剂D609 和PKA抑制剂H89与ET-1 共同注射不能扭转ET-1 引起的热痛觉过敏(P0.05)。2 ET-1 引起瘙痒作用大鼠左侧脸颊皮下注射ET-1产生明显的搔抓行为,BQ123与ET-1共同皮下注射能阻断ET-1 产生的瘙痒(P0.01),而BQ788共同注射却增加大鼠搔抓次数(P0.05)。PKC 抑制剂BIM和PLC抑制剂U73122与ET-1共同大鼠皮下注射抑制ET-1引起的搔抓行为I(P0.01)。而PC-PLC 抑制剂D609和PKA抑制剂H89与ET-1 则不能抑制ET-1 引发的搔抓行为(P0.05)。3NO不参与ET-1 引起的热痛觉过敏和瘙痒过程非选择NOS抑制剂L-NAME与ET-1共同注射对ET-1引起的热痛觉过敏和瘙痒没有影响。ETB受体激动剂IRL-1620和KOR激动剂U5048作用在培养的角质形成细胞后不产生NO。结论:1、ET-1 通过ETA/PLC/PKC 共同途径介导热痛觉过敏和瘙痒;2、NO不参与ET-1引起的热痛觉过敏和瘙痒过程。关键词:内皮素-1;热痛觉过敏;瘙痒AbstractObjective:Endothelin-1(ET-1)wasfirstisolationfromtheculturesofporcineaortic endothelialcellculturesbyJ

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