凝固血液DNABloodClotDNA.pdf

天 CAT#:71002-30 CAT#:71002-100 净 常温运输及保存 沙 系 列 凝固血液 DNAOUT Blood Clot DNAOUT 使用手册 V1.0 北京天恩泽基因科技有限公司 北京市海淀区上地信息路 26 号北京市留学人员海淀创业园中关村创业大厦 506 网址：；电话：400-6765278；电邮：order@ 产品及特点 凝固血液DNAout 是天泽基因自主开发的专门提取新鲜或冷冻凝固血液基因组 DNA 的试剂盒。本产品具有下列特点: 1. DNA 纯净，OD260/280 在 1.8-2.0 之间，可直接用于 PCR、酶切、杂交等。 提取得到的 DNA 大小在 30-50 Kb 之间 2. 每 mL 新鲜凝固全血 DNA产量为 20-50 ug 左右，每 mL 冻存的凝固全血 DNA 产量为 2-10 ug 左右。 3. 安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。 4. 操作快速， 整个过程在 30 分钟内即可完成。 规格及成分 成 份 编 号 30 次包装 100 次包装 溶液 A 71002A 15 mL 50 mL 溶液 B 71002B 15 mL 50 mL 使用手册 71002sc 1 份 1 份 运输及保存 常温运输及保存，有效期一年。 自备试剂 氯仿、异丙醇、75%乙醇 使用方法 1. 65℃预热溶液 A，待其沉淀溶化后，充分混匀，取 0.5 mL 加入到 10-15mL 塑料离心管中并放置于 65℃待用。 2. 称取新鲜凝固血液组织 0.5 g 左右 (如果是干的血块，只需要 50 mg 左右并需 要剪成微小的碎片)，加入到上步的溶液 A 中匀浆，直到。匀浆过程中将产生 大量泡沫，属于正常现象。 3. 将匀浆液置于 65℃水浴保温 5 分钟，然后将匀浆液(包括凝固血液碎片)全部转 移到新的 1.5 mL 塑料离心管中。 4. 12000-15000 g室温离心3分钟，将上清转移到新的1.5 mL塑料离心管中(上 清液的体积一般为 300 µL 左右)。 5. 在上清液中加入等体积的溶液 B，上下颠倒 30 秒充分混匀后冰浴 5 分钟。 6. 12000-15000 g 室温离心 3 分钟，转移上清到新的 1.5 mL 塑料离心管中。 7. 加入 0.2 mL 的氯仿(自备)，震荡器上充分振荡 30 秒混匀。 8. 12000-15000 g 室温离心 3 分钟，两相交界面将有白色膜状物。小心转移上 清到新的 1.5 mL 塑料离心管中。 9. 重复 7-8 步一次。 10. 加入 1 倍体积的异丙醇(自备)，上下颠倒 30 秒混匀，12000-15000 g 离心 5 分钟，弃上清，管底将有微小 DNA 沉淀。 11. 沉淀用 75%乙醇清洗 2 次后，室温晾干。 12. 加入 50-100 µL 自备 TE 溶解