血细胞计数与血型.pptVIP

血细胞计数与血型的测定 戴永超 冯鹤静 目录 目录 实验安全 本实验需要采集指血，所以应注意取血时的消毒、安全。 我们在预实验时询问了李老师实验时应注意的事项 在正式实验前的准备中，对实验用的棉花及取血用的10μl移液器枪头进行了高压消毒。 正式实验中准备了75%的酒精以供消毒。 指导同学们正确消毒的方法，并提醒大家消毒取血针的端部。 实验态度及经验 正式实验之前做了至少五次的预实验，但数据记录中有效的、清晰的有四次，所以我们把预实验阶段分为了四部分 创新实验次数很多，有时间就去 经验： 1.在周一到周五之间把实验需要的药品、仪器告诉老师，在老师的帮助下进行准备 2.实验前尽量将操作步骤写清楚并且称取的量最好精确以减少实验时间的浪费 3.实验数据记录要详细，失败的、没有意义的也需要记录，最好对实验的过程和结果进行照片记录，必要时可进行摄像。我们对显微镜下的图像进行了实时拍照，这对于后期结果的分析起了很大的帮助。 4.实验过程中要清楚样品来源，我们曾经错把一同实验的同学所用的羊血混进了我们的实验，错认为某位姓杨的同学的血液 预实验 第一次 学习光学显微镜的使用、校准、测量，观察计数板，学习移液器的使用，配制红细胞稀释液和白细胞稀释液 第二次 学习取血方法和注意事项，正式实践取血 第三次 实验手册中给出的红细胞稀释液是Hayem液，而此配方中有HgCl2 ,实验室不提供，所以我们上网搜集了其他红细胞稀释液的配方 对不同配制的红细胞稀释液进行比较实验，选取较合适的红细胞稀释液 1.柠檬酸钠3g+甲醛1ml，加蒸馏水至100ml 2.柠檬酸钠3g+甲醛1ml，加生理盐水至100ml 3.碳酸氢钠0.5g+无水碳酸钠0.5g，加水至100ml 4.生理盐水 1.柠檬酸钠3g+甲醛1ml，加蒸馏水至100ml 2.柠檬酸钠3g+甲醛1ml，加生理盐水至100ml 3.碳酸氢钠0.5g+无水碳酸钠0.5g，加水至100ml 4.生理盐水 我们也查到了另一个红细胞稀释液配制方法： 柠檬酸钠+伊红+甲醛，但当时实验室未准备伊红，所以放弃了。 最后我们选择了第一和第三两个方案在正式实验时同时进行 第四次 考察时间对红细胞稀释液的影响 碳酸氢钠和无水碳酸钠 间隔时间一天 移液器的使用 认识物镜测微尺 利用物镜测微尺确定目镜单格长度 验血片照片 显微镜下凝血照片 带实验效果 实验中出现的问题 有的同学对于光学显微镜的玻片夹的使用不清楚，认为是把玻片夹压在载玻片上，而不是用玻片夹把拨片卡住，对仪器造成了一定程度的损坏 有的同学在进行红细胞直径测定时，没有把镜下效果调至最清楚的状态。红细胞边缘仍处于模糊状态时就进行了测定致使测得结果偏大。 有的同学充液后，调节细准焦螺旋后发现红细胞有很多层，不知应该计算那一层。 解决方法：静置一段时间，至所有红细胞沉降为一层 血细胞计数板的刻线很浅，若光线过强，很难找到刻线 解决方法：将光圈调至最低档，将光线调至最亮，利用此方法可以很清楚的发现刻线并且能够看清红细胞 实验中出现的问题 有两组同学取的血都来自同一名男同学，但两组的结果都比正常范围值偏小，重复做了几遍都偏小。我们开始怀疑是计数板、光学显微镜及液体未摇匀的问题，更换了计数板、光学显微镜并且充分长时间摇晃离心管，结果还是偏小。 最后我们发现了是移液器的问题：1.移液器不能准确移取液体2.同学的操作有错误，取液和移液都把移液器调到了最低档 经过纠正，问题得到了解决 实验中在10倍镜下有时无法分辨白细胞和杂质，可以在40倍镜下确认。 在进行血型测定时，怀疑一个现象是冷凝集 验证方法：在37℃水浴5min后再进行观察，检测 实验报告的批改 我们先对全班的报告进行了批改，然后交给李老师进行进一步批改。批改后发回让同学们进行自行修改，修改后老师根据修改情况给予成绩，并在上课时对报告进行了点评。 报告中的问题 由于是第一次写报告，大家对于文献书写格式、报告书写的角度都不是很清楚，很多报告在操作讨论中完全抄文献，没有将自己的实验结果和文献相结合。而且就实验本身同学们思考的角度过窄，深度也不够。经过老师的点评和讲解，同学们对于如何写报告有了清楚的了解，在之后的报告中有了明显的改观。 同学报告中的亮点： 有的同学提出了正反定型实验，是很好的建议。我们认为正反定型实验不属于创新实验，所以在后续的实验中没有进行操作，但我们认为可以作为下一届同学的正式实验的改进。 有的同学报告中提到了细胞稀释液等渗的问题，对我们是很好的启发，并在创新实验中进行了探讨，详见创新实验。 有的同学提到我们在正式实验中将全班分为两大组取用两种不同的红细胞稀释液的做法不合理，因为没有考虑到个体差