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三维试验检测阴沟肠杆菌产β内酰胺酶 作者：张益新 单位：浙江省义乌市中心医院 义乌 【关键词】 阴沟肠杆菌 超广谱beta;内酰酶 AmpC酶 三维试验 本研究通过对阴沟肠杆菌产beta;内酰胺酶(主要是ESBLs与AmpC酶)的监测，了解临床上耐三代头孢的阴沟肠杆菌耐药的主要原因及ESBLs与AmpC酶于此类耐药中出现频率（即其流行情况），并同时统计这些耐药菌对其它抗生素的耐药情况，现报道如下。 1 材料与方法 1.1 材 料 ①菌株：2006年1月～2007年2月本院收集的对三代头孢耐药的阴沟肠杆菌33例。大肠埃希菌标准菌株ATCC25922一株。质控株为经VITEK确认产ESBLs的肺炎克雷伯菌一株。②药敏纸片：头孢西丁（FOX）、头孢吡肟（FEP）。③其它：生理盐水、克拉维酸粉剂、氯唑西林粉剂、血平板、MH平板等。 1.2 方 法 ①粗提酶（冻融裂解法）[1]：新分离的纯菌种配成0.5McFarland密涂于1/4MH琼脂平板（phi;=90mm）上，35℃培养24小时后用无菌棉签取下全部菌苔于1ml灭菌生理盐水中（用1.5ml离心管），-80℃冻融数次，培养无菌生长后4℃10000r/min离心20min，取上清液头孢硝噻吩纸片确定beta;内酰胺酶存在[1]后置-20℃保存待用。②改良三维实验[1，2]：将大肠埃希菌标准株ATCC25922配成0.5McF