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2. 神经递质释放量的测定 脑透析法: 可测定不同脑区的多巴胺及其代谢产物,氨基酸,乙酰胆碱,去甲肾上腺素,5-HT等。神经肽的测定较难,主要由于探头半透膜要求较高。 1. 电压钳 (voltage clamp) Hodgkin等,20世纪50年代 电压电极、电流电极 反馈放大器 (feedback amplifer) 结合药理学方法 (三) 电生理学方法 2. 膜片钳 (patch clamp) Neher和Sakmann,1976(nAchR单离子通道电流,1991,Noble ) 可测量单通道离子电流 现在发现:通道的开放和关闭都是突然发生并似乎是全或无式的,开放的持续时间长短不一,但都有恒定的电导值。 (四)生物化学方法 1. 放射免疫法(radioimmunoassay, RIA) 用抗原-抗体反应原理,将抗原标记上放射性同位素,用来测定与此抗原性质相同的物质。RIA包括以下基本步骤:样品采集、加样、反应、分离、测定抗原-抗体复合物的放射性(cpm), 与标准曲线对照计算待测物质含量。 2.高效液相层析 ( high performance liquid chromatography, HPLC) 利用分子间特异性及可逆性的结合,将其一方固定于层析的固定相中,使流动相中能特异性结合于该分子的物质与其结合,然后再改变条件,使被分离物质洗脱,用一定波长紫外光检测。 HPLC是分离分析生物活性物质和受体的重要手段。 (五)分子生物学方法 1. 基因分子克隆及表达 人类染色体大约有3×109碱基和5-10万个基因。基因克隆是特定基因从基因组中分离出来在细菌中扩增的过程。克隆基因目的是获得大量的纯DNA分子。 2. PCR PCR是一种酶促化学反应,可在含有多种核酸分子的混合液中选择性地大量扩增某一种核酸分子的特定序列。该方法具有极高的灵敏度和特异性,在含有多种杂质的条件下,可选择性扩增细胞基因组中一个特定的DNA片段达数百万至数千万倍。 3. 转基因(Transfers gene) 根据遗传学原理,在体外合成含有突变序列的DNA片段,植入细胞染色体,通过制造定位定向转基因改变哺乳动物的基因型以产生转基因的动物。 4. 基因敲除(gene knockout) 基因敲除是80年代初出现的一项新的基因工程技术。 采用同源重组的方法,用体外合成的无效基因或突变基因取代相应正常基因,再应用转基因方法孵育出转基因动物,即为基因敲除动物。通过分析基因敲除动物单基因缺陷来研究基因调控、基因功能、建立疾病模型、药物作用及基因治疗。 5. 生物芯片技术(biochip) 生物芯片技术是在1个平方厘米大小的薄型载体上,通过微加工技术获得微米级结构,并与生物化学处理等技术相结合而发展起来的一种新型技术。它可以把多至几十万个的生命信息集成在一块芯片上,进行各种与生命科学和医学相关的生物化学反应,对基因、蛋白、活体细胞及组织等进行分析和检测。 (六) 脑成像技术 计算机断层成像术 (computerized tomography, CT) 正电子发射断层成像术 (positron emission tomography, PET) 磁共振成像 (magnetic resonance imaging, MRI) 神经生物学(高等教育出版社第二版) 全书分6篇, 24章 第一篇 神经活动的基本过程 : 第一章 神经元和突触 第二章 神经元膜 的电学特性和静息电位 第三章 神经电信 号和动作电位 第四章 神经电信号的传递 第五章 神经递质和神经肽 第六章 离子通 道与胞内钙离子平衡 第七章 受体与信号转导 第二篇 神经系统的发育 : 第八章 神经系统发育 第三篇 感觉系统 : 第九章 视觉 第十章 听觉 第十一章 味觉与嗅觉 第十二章 躯体感觉 第十三章 平衡觉和本体感觉 第四篇 运动系统 第十四章 躯体运动及其中枢控制 第十五章 自主神经系统 第五篇 脑的高级功能 第十六章 弥散性调制系统与行为 第十七章 情绪的脑机制 第十八章 睡眠与觉醒的脑机制 第十九章 学习和记忆 第二十章 大脑联合皮层和功能一侧化 第二十一章 语言和语言障碍 第二十二章 注意的神经基础 第二十三章 脑成像技术的基本原理 第六篇 神经、内分泌与免疫系统的关系 第二十四章 神经、内分泌与免疫系统的相互调节附录 神经系统的组构名词索
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