病毒学（Virology）全 武大教材.ppt

* 病毒的整个RNA基因组（如Picornaviruses）或部分RNA基因组（如Togaviruses ， Coronaviruses），直接翻译成为一聚蛋白前体，再经蛋白酶水解切割产生不同的功能蛋白质。 3、RNA病毒的复制 （1）RNA病毒基因组的复制和mRNA合成策略 （2）病毒的依赖于RNA的RNA聚合酶（RNA-dependent RNA polymerase, RdRp） 1960年在Polioviruses和Mengoviruses的研究中发现依赖于RNA的RNA聚合酶。 A、病毒的RNA聚合酶通常为由几个病毒基因产物构成的多亚单位装配物，如Influenzavmses的RdRp由PA,PB1,PB2组成。 B、按照在感染中的活性，病毒的RdRp可分为： 复制酶：从病毒RNA复制产生子代基因组 转录酶：从病毒RNA转录产生mRNA。 C、病毒的RdRp缺乏校读活性，故病毒RNA复制的碱基错配率很高（高于DNA复制的10,000倍以上），这亦是RNA病毒频于变异的原因。 （3）病毒的逆转录酶（retrotranscriptase, RT） 1970年，Baltimore和Temin分别在劳斯肉瘤病毒（Rous sarcoma viruses）和禽白血病病毒（Avian leucosis viruses）的研究中发现逆转录酶。 A、逆转录酶具有四种酶活性： 依赖于RNA的DNA多聚酶（RdRp）活性。 依赖于DNA的DNA多聚酶（DdDp） 解旋酶活性 RNaseH活性 B、逆转录酶在以RNA作为模板进行DNA合成的过程中（RdDp活性）亦缺乏校读活性，故在在复制过程中有逆转录阶段的RNA病毒（Retroviruses）和DNA病毒（Hepadnaviruses）突变率高，频于变异。 （4）RNA病毒的转录 A、转录方式的转录：产生不完全转录本，作为mRNA。 B、复制方式转录：产生完全转录本，作为子代链或子代链合成的模板。 （5）RNA病毒的翻译 A、5`端有帽子结构的正链RNA病毒的基因组RNA，负链RNA病毒和双链RNA病毒的mRNA，以依赖于5`帽子的扫描机制进行翻译。 B、5`端无帽子结构的正链RNA病毒（如Picornaviruses）以内部核糖体结合机制进行翻译。 内部核糖体进入位点（Internal ribosome entry site, IRES） RNA病毒的转录策略 4、DNA病毒的复制 (1)痘病毒（如Poxviruses）的复制示意图 （2）疱疹病毒（如Herpesviruses）的复制示意图 （3）嗜肝DNA病毒（如Hepadnaviruses）复制示意图 （4）多瘤病毒（如Polyomaviruses）复制示意图 第五节 病毒的装配与释放 一、病毒的装配1、自我装配(self assembly)病毒的壳体蛋白亚基以结晶作用的方式自发地装配成病毒壳体.2、指导装配（directive assembly）　　有病毒基因组编码的某些非结构蛋白，即形态发生因子（morphogentie factor）是与分子病毒，壳体装配。 形态发生因子的功能： （1）脚手架蛋白（scaffolding protein）,在病毒壳体过程中具有瞬时功能，但是不结合入病毒体结构中，一旦病毒壳体装配成熟，脚本架蛋白便从病毒壳体中除去，或是被水解，或是与下一轮病毒壳体装配。 （2）蛋白质水解切割，在大多数噬菌体或动物病毒装配过程 ，毒粒的成往往需要在前头部（prehead）或前毒粒（previrion）形成后，对其中较大的前体蛋白的进行切割加工。 3、病毒的包装层号（packacing single） 病毒基因组能与壳体蛋白相通过识别、结合起始包装的顺式作用元件。 如Retroviruses Hepatitis Bvirus(HBV)序列 4、病毒的包装容量 对于具二十面体壳体的病毒而言由于形成空壳（empty capsid）后再进行核核酸的包装，所以存在包装容量的限制。如Ademoviruses的壳体所能包装DNA的容量不能超过基因组长度的105%。 二、一步生长试验（one step growth experiment） 1、概念：处于特殊培养的细胞被病毒同步感染，以致可由整个细胞群体所发生的病毒复制事件，推知单个细胞所发生的病毒复制事件。 2、方法： （1）以适量的病毒接种处于标准条件下培养的高浓度的敏感细胞（低感染复数感染，以使一个细胞只被一个病毒感染）