好氧厌氧氨氧化耦合颗粒污泥完全自营养脱氮机理和模拟优化-mechanism and simulation optimization of aerobic anaerobic ammonium oxidation coupled with complete self-nutrition nitrogen removal of granular sludge.docx

摘要好氧氨氧化与厌氧氨氧化耦合颗粒污泥完全自营养脱氮与传统的硝化反硝化 过程相比可以减少 60％以上的 O2 消耗并且不消耗 COD，能大幅减少废水生物脱 氮过程的能量消耗和 CO2 排放量。论文通过 EGSB 连续运行试验、SBR 反应器间 歇实验和分子生物学测试，以及完全自营养脱氮动力学模型研究与模拟优化等方 法，研究好氧厌氧氨氧化耦合颗粒污泥完全自营养脱氮机理，优化颗粒污泥生物 反应器的运行条件，研究添加微量 NO2 条件下限制 DO 曝气方法强化生物反应器 完全自营养脱氮特性等，论文得到如下主要研究结果：①在EGSB反应器中接种厌氧颗粒污泥，采用间歇进水、间歇出水方式运行210 天，成功启动了厌氧氨氧化反应器。在总氮容积负荷为0.11 kg/（m3·d）下，氨氮 去除效率达75%，亚硝酸盐氮去除效率达85%，污泥颜色由原来的黑色渐渐变为棕色，形成新的厌氧氨氧化污泥颗粒粒径较小。氨氮、亚硝酸盐氮去除量和硝酸盐氮生成量的比例为1:1.1:0.18。在对厌氧氨氧化过程电子流分析基础上，建立了厌 氧氨氧化细胞产率系数与NH4+、NO2-去除量和NO3-生成量之间的计量学关系，估算得厌氧氨氧化菌产率系数为0.080mol CH2O0.5N0.15/mol NH4+。②通过 SBR 反应器间歇实验，研究了基质浓度、pH 值和温度对厌氧氨氧化活 性的影响。结果表明可用 Andrews 方程描述氨氮和亚硝酸盐氮浓度对厌氧氨氧化动力学特性的影响，动力学分析表明理论最大氨氧化速率 369.94 mg/（gMLSS·d）、氨氮半饱和系数值 30.39mg/L、亚硝酸盐氮半饱和系数值 25.54mg/L、氨氨抑制常 数为 148.44mg/L、亚硝酸盐对厌氧氨氧化的抑制常数为 90.64 mg/L。当氨浓度为67.12 mg/L、亚硝酸盐氮浓度为 48.11mg/L，表观最大厌氧氨氧化速率达 93.53mg/（gMLSS·d）。pH 值是影响厌氧氨氧化活性的重要因素，pH 过高或过低都不利于 细菌生长和反应进行，本研究中厌氧氨氧化菌的最适 pH 为 8.04。20℃ ~ 30℃条件下，厌氧氨氧化反应速率与温度的关系可用修正的 Arrhenius 方程描述。③使用电解质呼吸仪测定间歇实验中好氧氨氧化过程的累积耗氧量和耗氧速 率，通过 Mann-Kendell 趋势检验方法确定好氧氨氧化菌进入内源呼吸的时刻以及内源呼吸过程中耗氧速率，计算氨氮氧化的耗氧量。基于好氧氨氧化过程中合成代谢和能量代谢耦合，测得好氧氨氧化污泥产率系数为 0.199mgCOD/ mg NH4+-N。④在 EGSB 反应器中同时接种好氧氨氧化污泥和厌氧氨氧化污泥进行完全自 营养脱氮颗粒污泥的培养，pH 控制在 7.6～8.0，DO 控制在 0.6～0.8 mg/L，上升流速为 4.2m/h。反应器经过 120 多天的运行，NH4+-N 去除效率达 75%，总氮去除 效率为 52%，总氮去除速率达 0.101 kg/（m3·d），颗粒污泥粒径主要分布在0.5~1.0mm。⑤在 SBR 间歇实验中，DO 一定的条件下完全自营养脱氮速率在一定范围内 随 NH4+-N 浓度而提高，NH4+-N 浓度为 150mg/L 时未发现对完全自营养脱氮活性 的显著抑制。DO 对完全自营养脱氮过程的影响主要体现在两个方面：过高的 DO会抑制厌氧氨氧化活性，提高亚硝酸盐氧化速率，导致 NO2-和 NO3-在反应器内积累，降低总氮去除效率；DO 过低时，好氧氨氧化过程中 NO2-生成速率较低，限 制了厌氧氨氧化速率的提高，总氮去除速率较低，但反应器内 NO2-和 NO3-积累较少，总氮去除效率较高。⑥提取污泥中细菌总 DNA 并纯化，以好氧氨氧化菌 AmoA 基因为进化指标 设计特异性引物 AMo-F/AMo-R，对好氧氨氧化菌 AmoA 基因部分序列进行 PCR扩增，扩增片段克隆到 pMD19-T 载体并测序，测得序列的系统发育分析表明污泥中的好氧氨氧化菌主要是亚硝化单胞菌属，与 Nitrosomonas europaea 具有95％～98％的同源性。根据厌氧氨氧化菌的 16SrDNA 序列中的特异序列片断设 计特异引物 Anammox1/ Anammox2，对厌氧氨氧化菌 16SrDNA 进行 PCR 扩增。扩增产物连接到 pMD19-T 载体，将载体转化到感受态细胞大肠杆菌 JM109 中， 并对其 16SrDNA 基因进行测序。测序结果进行系统发育树分析，表明富集得到的厌氧氨氧化菌与 Candidatus Anammoxoglobus propionicus 进化关系比较接近。⑦基于边界层假设模拟颗粒污泥与主体液相间传质过程，并将其与颗粒污泥 内传质过程以及好氧氨氧化菌、厌氧氨