(微生物学)8 微生物的遗传育种知识介绍.pptVIP

第八章微生物的遗传育种;一、几个基本概念;表型(phenotype)：某一生物体所具有的一切外表特征及内在特性的总和，是遗传型在合适环境下通过代谢和发育而得到的具体表现。 遗传型（可能性） + 环境条件 → 表型（现实性） 变异(variation)：生物体在某种外因或内因的作用下所引起的遗传物质结构或数量的改变，即遗传型的改变。 ;饰变(modification)：外表的修饰性改变，不涉及遗传物质结构改变，而只发生在转录、转译水平上的表型变化。饰变是不遗传的 。 ;二、遗传变异的物质基础;Discovery of DNA as genetic material（一）;Discovery of DNA as genetic material（二）;2、Phage infection;3、TMV重建实验;核酸在胞内存在的七个水平;核酸水平：是DNA还是RNA、是复合还是裸露、是长还是短等； 基因水平：依基因功能可分为结构基因及调控基因等； 密码子水平：结构密码子、起始与终止密码子等； 碱基水平：突变的最低交换单位有A、T、G、C等。 ;三、基因突变（Gene mutation）;1、基因突变的特点;稳定性：新的诱变性状是稳定的、可遗传的。 可逆性：野生型基因 突变型基因 不对称性 ：突变性状与引起突变的原因间无直接的对应关系。 ;2、基因突变的自发性与不对称性的证明;3、突变类型;营养缺陷型;4、UV对DNA的损伤及其修复;光复活作用：把经UV照射后的微生物立即暴露于可见光下时，可明显降低其死亡率的现象。所以在进行紫外线诱变育种时，只能在红光下进行照射和后续操作，并在黑暗条件下培养。 光解酶;暗修复作用（切除修复） 内切核酸酶 外切核酸酶 DNA聚合酶 DNA连接酶 ;四、菌种选育;定向培育优良菌株 一种利用微生物的自发突变，并采用特定的选择条件，通过对微生物群体不断移植以选育出较优良菌株的古老方法。 卡介苗;诱变育种;诱变育种的基本环节;诱变育种步骤;3. 处理单孢子（或单细胞）悬液 选用最适的诱变剂量 UV剂量指强度与作用时间的乘积； 常以杀菌率作为诱变剂的相对剂量； 多采用杀菌率为70~75%甚至更低（30~70%）的相对剂量。;充分利用复合处理的协同效应 设计或采用高效筛选方案或方法 初筛：以量为主，利用和创造形态、生??与产量间的相关指标，可在培养皿或摇瓶中进行。 复筛：以质为主，一般采用摇瓶培养或台式发酵罐进行发酵，然后对培养液进行分析测定，选出较理想的菌种。;诱变因子的复合处理及其协同效应 菌种 单 独 处 理 复 合 处 理 诱变剂 突变率% 诱变剂 突变率% 土曲霉 紫外线 21.3 X射线+紫外线 42.8 X射线 19.7 土曲霉 氮芥0.1% 不明显 氮芥+紫外线 11.0 紫外线 4.7 链霉菌 紫外线 31.0 紫外线+γ射线 43.6 γ射线 35.0 金色链霉菌 二乙烯三胺 6.06 二乙烯三胺+紫外线 26.6 （2U-84） 硫酸二乙酯 1.78 硫酸二乙酯+紫外线 35.86 紫外线 12.5 灰色链霉菌 紫外线 9.8 紫外线+可见光照射1次 9.7 （JIC-1) 紫外线+可见光照射6次 16.6;几个基本概念;五、营养缺陷型（Auxotroph）的筛选;检出缺陷型 夹层培养法 限量补充培养法 影印平板法 逐个检出法 鉴定缺陷型：生长谱法 ;六、基因重组（Gene recombination）;1、Transformation（转化）;2、Trans