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如何做到准确-检出限值（灵敏度） 如何做到准确-检出限值（灵敏度） 检测低限、生物检出限、功能灵敏度关系 检测低限 生物检出限 功能灵敏度 如何做到准确-检测范围 检测范围：病人样品未经过任何预处理，由检验方法得到可靠结果范围为病人结果检测范围。 也即在此范围内不同病人样品报告结果值间的比值反映各样品内含有的分析物确实有这样的比例关系。 如何做到准确-检测范围 检测范围下限：检测系统的功能灵敏度； 检测范围上限：能够测到的成比例关系的最大值。 如何做到准确-检测范围 检测范围上限： 如何做到准确-检测范围 检测范围上限建立： 1、使用7-11个高值样本，并且20%-30%的样本超出预期的测量范围，在可接受的线性相应范围内，舍去非线性点，得到较宽的线性范围。 2、使用低值样本稀释高值样本，形成涵盖低中高范围的样本。（低值样本确定没有基质效应、尽量不含干扰物的） 3、每个样本重复测定2-4次，某些浓度可重复测定多次。 4、分析测定结果与预期结果是否呈线性关系，取呈线性关系的最大浓度值作为检测范围的上限。 如何做到准确-检测范围 回收试验：使用基质液加入高值标准液，预期值与测定值之间的比值，为回收率，一般要求90%-110% 如何做到准确-可报告范围 某些项目，如HCG，AFP，其临床上往往有很高的值，并且也需要对这些值进行准确定量，需要对样本进行稀释，确认最大稀释比例。 可报告范围下限：功能灵敏度 可报告范围上限：检测范围上限×稀释比例 如何做到准确-可报告范围 最大稀释比例的确定： 1、稀释液的基质效应 2、检测范围 试剂盒性能-总结 1、精密性 2、特异性（交叉、干扰） 3、灵敏度 4、检测范围（线性、HOOK、回收） 5、可报告范围 准确 * 认 识 试 剂 盒 陈晓玲 2011.9.21 ELISA 常识 根据包被和标记物质的不同，可以检测不同的标志物 包被物 标准品（阴/阳对照） 酶结合物 底物系统 试 剂 盒 对试剂盒的要求是测量准确 目的： 检测病人样本，提供准确的结果指导确定合理的临床方案。 为什么要准确 对任何病人每一项检测都应该准确 经历： 生病了，医院开了一堆的化验单，医生依靠化验单的结果来进行诊断、用药；如果结果不准，是否会延误病情？ 在一家医院检测的结果，到另一家医院不认了，需要重新检测 庞伟 杜丽 郭文珺 王义夫 2004年的雅典奥运会上，王义夫最终以0.2环的优势，夺得 10米气手枪冠军，成绩为690环。 王义夫的枪法天下第一！ 试剂盒测量结果 如何做到准确 人：操作人员 机：设备 料：试剂盒 法：操作规程、操作方法 环：环境 检测系统 如何做到准确-精密性 一、精密性要高：由于医院对每份样品只做一次检验就发出报告。这也是为什么国际上将精密性作为分析性能的第一位的原因。 精密性（Precision ）：在规定条件下所获得独立检测结果的接近程度。常用变异系数（CV）来表示。 CV= S/X×100% 其中，X为检测均值，S为连续测定的标准差，是各重复测定值对于均值的离散程度指标，反映了该检测系统的不精密度水平。 如何做到准确-精密性 考核方法： 国内常将精密性考核分为：批内、批间、分析内、分析间的水平； 国外将精密性考核分为重复性、再现性； 如何做到准确-精密性 考核方法： 重复性条件：独立的检测结果是在较短时间内，在同一实验室由同一操作人员于相同仪器上运用同一方法对同一检测物质进行检测所获得。 重复性：在相同检测条件下对同一待测物进行连续测量所得结果的接近程度。 再现性条件：检测结果由不同操作人员在不同的仪器上运用同一方法对相同检测项目进行测定所获得。 再现性：在变化的检测条件下对同一待测物进行检测所获得结果的接近程度。 皮实性 产品特性 如何做到准确-精密性 重复性考核方法：相同检测系统 对稳定的实验样品每天做2次实验、两次实验间隔超过两小时；每次进行2份重复；共进行20天。 分别计算运行内（分析内）、运行间（分析间）、天间的标准差，所有标准差的平方和即实验室的总标准差。 如何做到准确-精密性 影响精密性的因素： 1、研发过程： 活性材料 载体 反应体系 如何做到准确-精密性 影响精密性的因素： 1、生产过程： a、液体组分：保证均质性； b、固相： 载体 原辅材料 生产过程-准备阶段、生产过程、干燥阶段 如何做到准确-正确（特异性、干扰） 正确：保证测定物质是待测物而非其他物质。 样本 待测物 干扰物 交叉反应（特异性） 干扰反应 任何分析方法，定量或定性，都会受干扰 如