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深圳依诺金生物科技有限公司 产品说明书 Hyb高效杂交液 这些困难。Hyb 高效杂交液仅需要杂交 2–6 小时，而常规杂交则需要 12–24 小时。它也 能明显地降低非放射性检测的背景。以使 核酸杂交是一种应用于基因结构和表达 Northern 膜上的低拷贝 RNA 和 Southern 分析、基因组研究和临床诊断的常规技术。技 膜上的单拷贝基因得以检出。Hyb 高效杂交 术的成功依赖于影响探针与靶序列结合的一 液也适于各类 cDNA 表达芯片等。Hyb 高效 系列因素，包括：杂交温度、探针浓度、离子 杂交液可用于探针的放射性和非放射性标记， 强度、pH 及杂交液的粘度等。 并且在杂交后运用放射性和化学发光检测系 Hyb 高效杂交液是经优化的适合在正电 统（如地高幸标记的探针）可得到相当的结果。 荷尼龙膜上进行 Northern 和 Southern 下图简要说明 了放射性和非放射性标记的探 杂交分析的杂交液，典型的膜杂交需要长时间 针的杂交过程。 的孵育并且实验条件难于优化。而 Hyb 高效 杂交液的独特配方和操作规程可有效地消除 用 Hyb 高效杂交液 放射性或非放射性 进行膜预杂交 标记探针的变性 用 Hyb 高效杂交 液进行膜杂交 室温洗膜 放射性标记的探针 非放射性标记的探针 洗膜： 洗膜： 50 ℃ （ cDNA 探 针 的 Southern, 65℃ （cDNA 探针 Northern/Colony 杂交 ） Northern, Colony 杂交） 60℃（cDNA 探针的 Southern 杂交） 室温 （寡核苷酸探针的 Southern, 42℃（寡核苷酸探针 Southern/Northern Northern 杂交） 杂交） X-光片曝光检测杂交信号 化学显色或化学发光法检测杂交信号 1. 概论 在开始操作之前，请认真阅读整个操作方法。 Hyb 高效杂交液可用于 Southern 、 Hyb 高效杂交液应在室温低于 25℃时， Northern 或菌落杂交。唯一不同的是杂 可能会产生沉淀。如果产生沉淀，可在 68℃ 交温度的差异。Northern 和菌落杂交为 加热、搅动使沉淀完全溶解。 65℃。 Southern 杂交为 60℃。