ry104的抗肿瘤血管生成和侵袭研究-study on anti-tumor angiogenesis and invasion of ry 104.docx

目录目录I英文缩略词汇表IV摘要1ABSTRAT4引言7第一部分RY10-4的在肿瘤细胞中的抗血管生成作用101.实验材料及仪器：101.1试药的准备101.2实验材料101.3主要设备与仪器112.细胞的准备及增殖抑制实验112.1细胞培养及缺氧诱导112.2MTT细胞增殖实验122.3实验结果122.4结果讨论133.细胞迁移和小管形成实验143.1实验步骤143.2实验结果154.RY10-4对斑马鱼血管生成的影响174.1斑马鱼的来源174.2实验原理及步骤184.3实验结果184.4结果讨论195.免疫印迹法分析RY10-4对血管生成相关的信号通路蛋白的作用205.1溶液配制及方法205.2实验方法245.3实验结果285.4讨论296.统计学分析32第二部分RY10-4对于肿瘤细胞的侵袭抑制作用331.实验材料及仪器：331.1试药的准备331.2实验试剂331.3主要仪器与设备342.细胞培养以及核质分离342.1细胞培养342.2细胞核质分离343.细胞粘附实验353.1实验方法353.2实验结果353.3实验讨论364.体外迁移与侵袭实验374.1实验方法374.2实验结果374.3实验讨论385.E-Cadherin和β-catenin的免疫荧光分析405.1实验方法405.2实验结果405.3结果讨论416.RY10-4对Wnt及MAPK信号通路相关蛋白的免疫印迹分析436.1实验方法436.2实验结果436.3结果讨论457.统计性分析47第三部分RY10-4的检测方法学和初步药代研究481.仪器与试剂481.1实验试剂481.2实验仪器482.UV检测波长的确定483.HPLC-UV检测条件的确定及方法学493.1HPLC-UV的检测条件确定493.2专属性实验493.3线性关系试验503.5稳定性试验513.6最低检测限和最低检测量523.7结果与讨论524.RY10-4的在大鼠体内药物代谢学初步研究534.1药品与试剂534.2动物534.3生物样品处理534.4方法学考察544.5RY10-4在大鼠体内的组织分布565.实验结果565.1专属性实验565.2线性范围605.3回收率实验605.4精密度实验615.5最低检测限625.6稳定性实验625.7体内分布实验636.统计性分析68参考文献69综述78攻读博士学位期间的研究成果102致谢103英文缩略词汇表(ListofAbbreviation)ANOVAAnalysisofvariance单因素方差分析Dll4Deltalikeligand4类Delta4配体RY10-42-(1-hydroxy-4-oxo-2,5-cyclohexadien-1-yl)-4H-Pyran-4-oneDEDC2-(cis-1,2-dihydroxy-4-oxo-cyclohex-5-enyl)-5,7-dihydroxy-chromone2-(1-羟基-4-酮-2,5-环己二烯)-吡喃-4-酮2-(顺-1,2-二羟基-4-酮-环己-5-烯)-5,7-二羟基-色原酮PI3KPhosphatidylinositol3-hydroxykinase磷脂酰3-羟基激酶DMEMDulbcco’sModifedEagleMedium改良的Eagle培养基DMSODimethylsulfoxide二甲基亚砜UVUltraViolet紫外线EBEthidiumbromide溴化乙锭ECLEnhancedchemiluminescence增强型化学发光EDTAEthylenediaminetetraaceticacid乙二胺四乙酸HPLCHighPerformanceLiquidChromatography高效液相色谱ERKExtracellularsignal-regulatedkinase细胞外信号调节蛋白激酶FCSFetalcalfserum小牛血清JNKC-JunN-terminalkinasec-Jun氨基末端激酶MAPKMitogenactivatedproteinkinase丝裂原活化蛋白激酶MTT1-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-3,5-diph-enylformazan四甲基偶氮唑盐p38p38proteinp38蛋白NF-κBNuclearfactorKappaB核转录因子κBODOpticaldensity光密度值PBSPhosphatebuffersaline磷酸盐缓冲液AKTProteinKinaseB细胞激酶BPIPMSFHIFPVDFPropidiumIodidePhenylmethanesulfonylfluorideHypoxia-induciblefactorPolyvinyldifluoride碘化丙啶苯甲基磺酰氟