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-*- (2017浙江台州模拟)请回答杂交瘤技术和单克隆抗体制备的有关问题。 (1)杂交瘤技术制备单克隆抗体时,利用一定的物质,如生物诱导剂　　　　　　　作介导,使经免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选出融合的细胞再进行细胞的　　　培养,获得纯系细胞,同时还要进行 　　 　　检验,以保证获得的是所需的特定杂交瘤细胞。? (2)获得杂交瘤细胞后,在体外培养时需要特别加入的天然成分是　　　　。? 灭活的(仙台)病毒　 克隆 抗体 动物血清 -*- (3)下列有关杂交瘤细胞体外培养的叙述,正确的是　　　　。? A.用固体培养基培养 B.用滋养层细胞支持生长 C.能进行传代培养 D.需要对细胞进行研磨破碎获得产物 (4)现在欲利用基因工程技术生产单克隆抗体,科研小组将与抗体形成有关的关键基因通过噬菌体导入受体细胞,该技术的核心步骤是　　　　　　　　　,噬菌体是这些关键基因的　　　　。? C 形成重组DNA分子 载体 -*- 知识强化单克隆抗体与常规抗体的比较 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 考点1 考点1 考点1 考点1 考点1 考点2 考点1 考点1 考点1 考点1 -*- 克隆技术 -*- 植物的克隆 1.植物细胞的全能性 (1)概念:植物体的每个细胞都具有遗传上的全能性,因而都具有发育成完整植株的潜能。 (2)植物细胞全能性的原因:生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体所必需的全部基因。 -*- (3)植物细胞全能性的体现 ①植物体的几乎所有组织细胞通过诱导都可再生新植株。植物细胞的全能性比动物细胞更容易体现。 ②植物组织培养中细胞全能性下降的原因。 a.有可能是遗传物质变化:染色体畸变;细胞核变异;非整倍体产生。 b.生长发育条件变化:细胞中激素平衡被打破;细胞对外源生长物质敏感性发生改变。 c.随着时间的推移,由于其他各种原因产生了缺乏成胚性的细胞系。 -*- 2.植物组织培养 (1)理论基础:植物细胞的全能性。 (2)植物组织培养程序 配制培养基:配制含有适当营养物质和植物生长调节剂的半固体培养基 ↓ 切取消毒的组织块 ↓ 获得愈伤组织:由相对没有分化的活的薄壁细胞团组成的新生组织 ↓ 诱导新植株 -*- 3.原生质体培养与植物细胞工程 (1)原生质体的获得方法:在0.5~0.6 mol/L的甘露醇溶液环境(较高渗透压)下用纤维素酶和果胶酶混合液处理根尖、叶片、愈伤组织或悬浮培养细胞,除去细胞壁,获得球形原生质体,培养再生出新的植株。 (2)植物细胞工程操作过程 (3)植物细胞工程技术的应用 ①转基因植株培育。 ②培养特定细胞系,实现细胞次生代谢产物的工业化生产。 ③单倍体育种。 ④诱发、筛选突变体,如在培养基中加入不同浓度的NaCl或病原体毒蛋白,诱导和筛选抗盐或抗病突变体。 -*- 典例精析1某小组欲进行烟草原生质体分离与培养的研究。请回答下列问题。 (1)原生质体的分离:在无菌条件下,取烟草无菌苗的叶片,放入含有0.5 mol/L甘露醇(维持较高渗透压)的　　　　　　　　　混合液处理,经过离心纯化后获得原生质体。? 果胶酶、纤维素酶 -*- (2)原生质体的培养:将原生质体进行培养,重新长出细胞壁,形成胚性细胞。此时,应该　　　　培养基中甘露醇浓度,以利于胚性细胞继续培养形成细胞团,然后经两条途径形成再生植株。途径一:细胞团经球形胚、　　　　和胚状体,最后发育成植株。途径二:细胞团增殖为愈伤组织,然后在发芽培养基上诱导出芽,切割芽经过生根后形成完整植株。上述发芽培养基中含量相对较高的激素是　　　　　　　,胚性细胞的主要特点是　　　(A.液泡小、细胞核小　B.液泡大,细胞核大　C.液泡大,细胞核小　D.液泡小、细胞核大)。? (3)为了对烟草的某些性状进行改良,分离的到两种烟草的原生质体后,通过　　　　　　　　方法将它们的遗传物质组合在一起,经培养获得具有新性状的再生植株。提取再生植株的DNA,采用　　　　　　　扩增相关基因,来鉴定遗传物质是否成功重组。? 降低 心形胚 细胞分裂素 D　 原生质体融合 PCR方法 -*- 知识强化原生质体的获得及利用 -*- 下图中的①②③代表通过植物组织培养技术培育新植株的三条途径,请回答下列问题: (1)外植体c来自同种植株,植株C中的细胞全能性表达程度 　 (填“相同”或“可能不同”)。? (2)途径②和③需要用到　　　　　　和　　　　　　　(填培养基的物理性质)两种培养基,将含B1的试管放在摇床上,通过　　　　培养可以分散成单细胞 可能不同 液体培养基 固体(或半固体)培养基 液体悬浮 -*- (3)外植体c脱去细胞壁过程中需要加