抑癌基因tip30及相关蛋白p53 bcl-2在结直肠癌中的表达及意义-expression and significance of tip 30 and p53 bcl - 2 in colorectal cancer.docxVIP

抑癌基因TIP30及相关蛋白P53、Bcl-2在结直肠癌中的表达及意义专业：病理学研究生：唐斌导师：何常副教授摘要：目的：探讨结直肠癌中TIP30基因的表达及相关蛋白P53、Bcl-2表达与其生物学行为的关系及TIP30及与P53、Bcl-2表达的相关性。方法：（1）应用免疫组化SP法检测58例结直肠癌及20例结直肠粘膜慢性炎症组织中TIP30、P53及Bcl-2的表达；（2）应用甲基化特异性PCR（MSP）法对24例结直肠癌与相应的癌旁组织中TIP30基因启动子区5CpG岛甲基化的情况进行分析。结果：（1）TIP30在结直肠癌组织中的阳性表达率为36.28%（21例/58例），显著低于结直肠粘膜慢性炎症组织中的95%（19例/20例），差异有显著性(P0.01)；P53及Bcl-2在结直肠癌组织中的阳性表达率分别为62.07%（36例/58例）和70.69%（41例/58例），高于其在结直肠炎症组织中的30%（6例/20例）、35%（7例/20例），差异有显著性(P均0.05)；（2）TIP30、P53蛋白在结直肠癌中的表达与淋巴结转移有关（P0.05）；TIP30、Bcl-2蛋白在结直肠癌中的表达与肿瘤浸润程度有关（P0.05）；TIP30蛋白的表达与患者的预后有关（P0.05）；TIP30、P53蛋白在结直肠癌中的表达与肿瘤的TNM分期有关（P0.05)（3）TIP30与P53及Bcl-2在结直肠癌组织中的表达存在相关性(P0.05)；（4）24例新鲜结直肠癌组织中有9例存在TIP30基因启动子区5CpG岛甲基化，甲基化率为37.5%（9例/24例）；在相应的癌旁组织中有2例存在TIP30基因启动子区5CpG岛甲基化，甲基化率为8.33%；两者差异有显著性（P0.05）。TIP30基因启动子区5CpG岛的甲基化与结直肠癌的淋巴结转移有关。结论：Tip30、P53及Bcl-2参与了结直肠癌的发展和转移,TIP30、P53的表达在结直肠癌的预后中扮演着重要的角色，并且与结直肠癌的TNM分期有关；在结直肠癌中，TIP30的表达分别与P53和Bcl-2的表达具有协同作用；TIP30基因启动子区5CpG岛的甲基化可能是TIP30基因在结直肠癌中失活的重要方式之一。关键词：TIP30；P53;Bcl-2;结直肠肿瘤；癌；免疫组化；MSP前言结直肠癌是一种常见的消化道恶性肿瘤,近20年来,随着饮食结构、生活方式及环境的改变,世界上多数国家结直肠癌的发病率呈上升趋势,且趋于年轻化。据国际癌症研究中心估计，结直肠癌的发病率在全世界总的癌症发病率中列第四位[1]。我国随着生活水平的提高，饮食习惯的改变，结直肠癌的总体发病率也呈上升趋势。结直肠癌的发病是一个多因素多步骤的过程，是环境、饮食及生活习惯与遗传因素协同作用的结果。目前，研究者普遍认为结直肠癌的发生是一个涉及多基因、多步骤的复杂过程，涉及多个癌基因的激活和抑癌基因的失活。TIP30蛋白,是由Tip30基因编码的一种30kD的Tat(Transactivatoroftranscription)结合蛋白(Tat—InteractiveProtain)，又称HTATIP2(HIV—lTatinteractiveprotein2)，是XiaoH[2]等在研究人类免疫缺陷病毒(humanimmunodeficiencyvirus，HIV)的体外转录时发现的，其作为HIV转录的辅助因子可以和Tat相互结合特异性地提高HIV增殖。序列分析发现Tip30与肿瘤转移抑制基因CC3为同一基因。CC3是1997年ShtivelmanE[3]利用RNA差异显示技术发现的一种与肿瘤转移抑制相关的基因。细胞周期分析结果显示[4]，TIP30对G0～G1期细胞有阻断作用,从而使S期细胞比例下降,达到抑制肿瘤细胞增殖的作用。人类p53基因定位于17号染色体短臂1区31带（17p131），全长1620bp，基因组有11个外显子，10个内含子。P53基因具有进化的保守性，可在DNA复制水平上调节细胞的正常生长，是细胞生长的重要的负调节因子。p53基因分为野生型（WTP53）和突变性（MTP53）。WTP53的抗肿瘤作用主要是阻止G1/G0期，使细胞不能进入S期，从而抑制细胞的增值，更重要的是，WTP53基因在诱发细胞凋亡中起重要作用。有研究表明：TIP30上调WTP53后促进Bax和Bad从细胞质向线粒体的跃迁，引起细胞色素c的释放.然后激活caspase9/3和剪切PARP。因而Tip30介导的凋亡信号转导途径为p53/mitochondria/caspase-9途径,从而诱导细胞的凋亡。Bcl-2基因是Tsujimoto等在滤泡状B细胞淋巴瘤中首先鉴定的第一个抑制细胞凋亡的基因,具有抑制细胞丢失、阻止细胞凋亡的功能