gli1 foxm1在肺腺癌中的表达及其临床病理意义-expression of gli 1 fox m1 in lung adenocarcinoma and its clinicopathological significance.docx
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gli1 foxm1在肺腺癌中的表达及其临床病理意义-expression of gli 1 fox m1 in lung adenocarcinoma and its clinicopathological significance
摘要目的:1、检测GLI1、FOXM1在肺腺癌组织中的表达及其二者相关性,探讨肺腺癌组织中GLI1、FOXM1表达与临床病理特征及预后的关系。2、在细胞水平,探讨抑制肺腺癌细胞株A549中GLI1表达,对FOXM1表达及其EMT相关蛋白表达的影响。方法:1、采用免疫组织化学PV-9000二步法检测75例肺腺癌组织和75例癌旁正常组织中GLI1和FOXM1蛋白的表达并分析两者表达与临床病理特征和患者生存期的关系。2、于肺腺癌细胞株A549中使用GLI1特异性阻滞剂药物GANT61阻断GLI1基因表达后,采用Westernblot技术检测GLI1、FOXM1、EMT 分子标记物(上皮标志物E-cadherin、间质标志物Vimentin)的表达变化情况。结果:1、免疫组织化学检测结果显示:75例肺腺癌组织中GLI1阳性表达率86.7%(65/75)显著高于癌旁正常组织中的阳性表达率2.7%(2/75),P<0.01;75例肺腺癌患者病理参数中,GLI1蛋白表达与组织分化、淋巴转移有关,P0.05;2、免疫组织化学检测结果显示:75例肺腺癌组织中FOXM1阳性表达率76.8%(43/56)显著高于癌旁正常组织中的阳性表达率16.1%(9/56),P<0.01;75例肺腺癌患者病理参数中,FOXM1蛋白表达与组织分化有关,P0.01;GLI1 与FOXM1的表达呈明显正相关,(rs=0.575,P0.01)。3、生存期单因素分析结果显示GLI1表达(P=0.039)、肺腺癌新分类(P=0.001)、临床分期(P=0.000)、T分期(P=0.006)、淋巴转移(P=0.001)各组生存期存在明显差异(P<0.05或P0.01)。将筛选出的有意义的纳入COX回归模型多因素分析结果显示临床分期和GLI1表达是影响肺腺癌预后的独立危险因素,其相对危险度值分别为11.289(P0.05)、0.031(P0.05)。4、Westernblot检测结果显示:于A549细胞中使用不同浓度(10μM、20μM、30μM)GLI1特效抑制剂GANT61后,GLI1 蛋白在Control对照组、10μM组、20μM组、30μM组表达相对值分别为(0.2080±0.0010)、(0.1043±0.0020)、II(0.0846±0.0025)、(0.0056±0.0025);FOXM1蛋白在Con组、10 uM组、20uM组、30uM 组表达相对值分别为(1.1093±0.0015 )、(0.3720±0.0036 )、(0.2083±0.0030)、(0.0193±0.0025);Vimentin蛋白在Con组、10uM组、20uM组、30uM 组表达相对值分别为(0.7180±0.0010 )、(0.5083±0.1724 )、(0.3213±0.0550)、(0.1850±0.0196);E-cadherin蛋白在10uM组、Con组、20uM组、30uM 组表达相对值分别为(0.2120±0.0010 )、(0.9113±0.0020 )、(1.4153±0.0066)、(1.2076±0.0035)。药物处理浓度组各蛋白表达与Control 对照组相比,GLI1、FOXM1、Vimentin蛋白表达均下调,E-cadherin蛋白表达上调。单因素方差分析结果显示GLI1、FOXM1、Vimentin、E-cadherin蛋白的表达组间比较均存在明显差异,差异具有统计学意义(P=0.000)。SNK检验分析结果显示组间两两比较均存在显著差异,差异具有统计学意义。结论:1、GLI1、FOXM1在肺腺癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织,且二者呈正相关。GLI1蛋白表达与组织分化、淋巴结转移有关。FOXM1蛋白表达与组织分化有关。提示GLI1、FOXM1可能在肺腺癌的发生发展中发挥重要作用。2、预后分析中,GLI1表达阳性预后差,说明GLI1可以作为肺腺癌预后标记物,指导肺腺癌预后。3、于人肺腺癌A549细胞株中使用GLI1特异性阻滞剂药物GANT61后,GLI1 自身表达下降基础上FOXM1表达也随之下调,EMT上皮标志物E-cadherin表达明显上调,间质标志物Vimentin表达明显下调,提示GLI1可能通过激活下游靶基因FOXM1而促进肺腺癌侵袭转移(EMT)。关键词:肺腺癌;GLI1;FOXM1;侵袭和转移(EMT)IIIABSTRACTObjective:1、ToinvestigatetheexpressionlevelofGLI1andFOXM1andtheir correlation in lung adenocarcinoma and adjacent normal tissues,explore therelationship
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