假肥大型进行性肌营养不良患儿的基因型 表型相关性分析-genotype - phenotype correlation analysis of large progressive muscular dystrophy children with fake fertilizer.docxVIP

缩略词表CKcreatinekinase肌酸激酶EMGelectromyogram肌电图EBethidiumbromide溴化乙锭PCRpolymerase chainreaction聚合酶链反应EDTAethylenediaminetetraceticacid乙二胺四乙酸DMDDuchenne musculardystrophy杜氏肌营养不良BMDBeckermusculardystrophy贝克肌营养不良MLPAmultiplex-ligation-dependent-probe-amplification多重连接依赖的探针扩增SNPssinglenucleotidepolymorphisms单核苷酸多态性DHPLCdenaturinghigh-performanceliquidchromatograph变性高效液相色谱分析学位论文独创性声明本人声明，所呈交的学位论文系在导师指导下独立完成的研究成果。文中任何引用他人的成果，均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上已属于他人的任何研究成果，也不包含本人已用于其他学位申请的论文或成果。与我一同工作的同志对本研究所做出的任何贡献均在论文中作了明确的说明并表示谢意。本文如违反上述声明，愿意承担以下责任和后果：1、交回学校授予的学位证书；2、学校可在相关媒体上对作者本人的行为进行通报；3、本人按照学校规定的方式，对因不当取得学位给学校造成的名誉损害，进行公开道歉。4、本人负责因论文成果不实产生的法律纠纷。论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本人完全了解山西医科大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山西医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时，署名单位仍然为北京大学第一医院和山西医科大学。本研究知识产权属于北京大学第一医院。（保密论文在解密后应遵守此规定）论文作者签名：日期：年月日指导老师签名：日期：年月日（本声明的版权归山西医科大学所有，未经许可，任何单位及任何个人不得擅自使用）正文假肥大型进行性肌营养不良患儿的基因型、表型相关性研究引言假肥大型进行性肌营养不良是一种严重X-连锁隐性遗传神经肌肉疾病，又称杜氏或贝克肌营养不良（Duchenne/Beckermusculardystrophy,DMD/BMD），是以缓慢进行性加重的对称性肌无力和肌萎缩为特点的遗传性肌肉病变，主要累及骨骼肌，可伴静止性认知障碍和心肌损害[1]；DMD(Duchennemusculardystrophy,DMD,OMIM310200)和BMD（Becker musculardystrophy，BMD，OMIM300376）在男性新生婴儿中的发病率分别是1∕3500和1∕12000[2],其中DMD病情严重，预后不良，一般5岁前发病，6岁后出现行走困难，13岁前丧失行走能力而依靠轮椅生活，20岁左右因呼吸衰竭或心力衰竭而死亡；BMD病情变化多样，进展相对缓慢，在首次发病15～20年后仍可有行走能力,研究发现二者均是由于抗肌萎缩蛋白基因（Dystrophin基因，亦称DMD基因）突变所致，其主要的突变类型为基因的部分缺失或重复，占全部突变类型的50%～70%[3]。由于本病目前尚无有效治疗方法，故高效、准确的DMD 致病基因的检测、携带者的检出、产前诊断及遗传咨询成为预防本病的关键。多重连接探针扩增(multiplexligation-dependentprobeamplification，MLPA)是利用可与样本DNA正确杂交并被连接酶连接的特异性探针进行扩增和半定量分析[4]，是针对基因缺失或重复最有效的检测技术。该技术操作简单，灵敏性强，且有良好的重复性，是一种在同一反应中可同时检测到40个外显子的基因异常的半定量检测技术。本研究采用MLPA方法对收集到的100例DMD∕BMD病例进行DMD基因突变的检测，对部分患者采用特异抗体行免疫组织化学染色以探讨DMD 患者临床表型与基因型的关系。本研究所有检查均获得患者及家属的知情同意，并经北京大学第一医院伦理委员会批准。材料和方法一、研究对象收集自2007年3月至2010年3月就诊于北京大学第一医院儿科门诊、经临床诊断为DMD/BMD患者100例，其中DMD患者82例，BMD患者18例，均为无血缘关系男性，父母非近亲结婚。患者绝大部分为汉族（4例患儿的母亲为蒙古族）。DMD/BMD患儿的诊断依照国内外报道的DMD/BMD的诊断及相关参考文献[3]，纳入标准如下：1.男孩；2.儿童期隐匿起病；3.