姜黄素对人前列腺癌du145细胞tgfβsmads信号传导通路的影响-effect of curcumin on tgf β smads signaling pathway in human prostate cancer du 145 cells.docxVIP

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2018-08-14 发布于上海
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姜黄素对人前列腺癌du145细胞tgfβsmads信号传导通路的影响-effect of curcumin on tgf β smads signaling pathway in human prostate cancer du 145 cells

中文摘要目的：探讨中药提取物姜黄素对人雄激素非依赖性前列腺癌 DU-145 细胞 TGF-β/Smads 信号传导通路的影响，从而探讨姜黄素抑制 DU-145 细胞的机理。方法：采用细胞培养技术，将姜黄素配制成 12.5μmol/l、6.25 μmol/l 以及 3.125μmol/l 三个不同浓度组的溶液，分别处理 DU-145 细胞 48 小时。以光镜观察 DU-145 细胞形态变化，以 MTT 法检测 DU-145 细胞生长情况，以 ELLISA 法和 RT-PCR 法检测 TGF-β，SMAD2， SMAD4 和 SMAD7 的浓度和表达情况。结果：姜黄素溶液作用 DU-145 细胞 48 小时后，出现了细胞凋亡的形态学改变，表现为数量减少、体积缩小、染色质凝集、核固缩；DU-145 细胞生长受到抑制，呈一定的量效关系；ELLISA 法检测 DU-145 细胞 TGF-β，SMAD2 和 SMAD4 的吸光度 OD 值（代表上述物质浓度）均不同程度增加，而 SMAD7 的 OD 值不同程度减少； RT-PCR 法检测 DU-145 细胞 TGF-β，SMAD2 和 SMAD4 基因表达均不同程度增加，而 SMAD7 的基因表达不同程度减少。两种检测法得出结果一致。结论：姜黄素通过对 TGF-β及下游蛋白 Smad2、Smad4、Smad7 表达的影响，进而激活或调节 TGF-β/Smads 信号传导通路，这可能是姜黄素促进 DU-145 细胞凋亡和抑制其生长的重要分子机制。关键词：姜黄素；人前列腺癌 DU-145 细胞；TGF-β/Smads 信号传导通路；治疗机理ABSTRACTObjectives ： To observe the efficacy Curcumine having on TGF-β/Smads pathway of human DU-145 prostatic cancer cells in hormone- independent prostatic cancer，and to accordingly observe the principle of it restraining DU-145 cells.Methods：Cell cultivation was adopted with different groups using12.5μmol/l,6.25μmol/l and 3.125μmol/l Curcumine concentrations on DU-145 cells for 48 hours each. The DU-145 cells’ morphology was observed under optic microscope. The multiplication of DU-145 cells was measured by MTT method. Both ELLISA and RT-PCR methods was used to measure the concentrations and expressions of TGF-β，SMAD2，SMAD4 and SMAD7.Results：DU-145 cells’ morphologic changes were shown with number decreasing, volume reduction, chromatin coagulation and nucleus contraction after 48 hours’ influence Curcumine concentrations had on them. A certain quantity-effect relation was shown in each concentration group. The values of OD of TGF-β，SMAD2 and SMAD4 were increased by the concentration groups measured with ELLISA but SMAD7 were lowed. The expressions of TGF-β，SMAD2 and SMAD4 were increased by the concentration groups measured with RT-PCR but SMAD7 werelowed . The two methods of measurement showed the same results.Conclusions ： To intervention TGF-β ， SMAD2 ， SMAD4