现代实验室诊断在血液病学中的应用及地位ppt课件.ppt

巩固治疗结束后MRD检测及其意义 方法的标准化：在有经验的实验室，用低敏感（10-4）RT-PCR方法 PML/RARα（+）定义：指在完成巩固治疗后，间隔4周的二次骨髓标本，在两个有经验的实验室证实 标准方案巩固治疗：MCR可达90%-99% MDR检测结果决定后续治疗选择 维持治疗期间和以后的MRD监测 MRD监测适合于高危组患者，低危组患者似乎不需要监测 目前推荐：高危组患者巩固治疗后1年内每1-2个月检测1次，第2、3年每3个月1次 目前常用非定量RT-PCR，Q-RT-PCR的临床应用价值有待确定，但认为动态监测融合基因定量变化可为评估预后提供有益信息，便于调整治疗方案 巩固治疗后RT-PCR持续阴性与长期生存密切相关 一旦转为阳性提示即将血液学复发，需及时治疗 22号染色体 9号染色体 BCR ABL 1 13或14 2 11 210 KD 蛋白 BCR-ABL 基因 BCR-ABL mRNA Q-PCR CD34 PE CD15 FITC MRD (1) MRD (2) 2m after auto-SCT 3m after auto-SCT 0.24% 0.11% 0.07% 0% 15+/34+/33+ 干细胞学与实验室检测 展望 监测MRD对临床治疗策略的指导具体化 检测技术的改进，标准化 拓宽MRD检测应用范围,如淋巴瘤,多发性骨髓瘤等 进一步深入MRD的实验室研究，如对MRD细胞定位，内环境对其生长的影响，增殖动力学，与正常造血间的关系等 实验医学发展已进入分子阶段，但仍不足以揭示所有疾病的发病机制 由于基因的多态性，导致了个体差异，故未来的方向更应趋向于个体化 仍需寻求简便、高效、快捷的试验方法，为血液病诊断更好服务 感谢一直以来各位同仁们的大力支持与配合，使得我们的日常工作得以顺利、安全的进行！ 血液科与实验室都有着良好的发展前景，若创造机会、积极配合，未来一定会有更好、更完善的发展！ 感谢实验室给我们这样一个沟通和交流的机会，让我们彼此能更进一步的了解，更好的合作！ 血液科科训 * CBFβ-MYH11 inv(16)(p13;q22)及t(16;16)(p13;q22) 主要见于M4Eo，10%不伴异常嗜酸细胞M4，少见于M2 CBFβ-MYH11融合蛋白通过干扰核心结合因子（core binding factor,CBF）的转录激活作用而致病 具有CBFβ-MYH11的患者对化疗敏感，预后较好，故提高检测率尤具临床意义 DEK-CAN t(6;9)(p23;q34) 主要见于M2或M4，也见于M1，MDS-RAEB 伴DEK-CAN的患者年龄一般较轻，且预后较差 此类患者进行分子监测有助于判断患者预后，调整治疗方案 WT-1基因高表达 Wilms tumor 1 是无特异分子异常的急性白血病患者理想的MRD检测指标 伴此基因高表达者预后差，且表达程度与预后相关 BCR-ABL t(9;22)(q34;q11) 15~30%成人ALL及3~5%儿童ALL 9号染色体的断裂点与CML相同，但22号染色体断裂点具有异质性 此融合蛋白p190刺激细胞增殖的能力比p210要强。在转基因试验中观察到p190诱发的白血病具有起病早、发展快和恶性程度高的特点 BCR-ABL+ALL患者预后差，5年存活率20%，因此这些患者在缓解后需进行骨髓移植治疗 BCR-ABL BCR-ABL 巢式RT-PCR检测BCR-ABL融合基因用于CML移植患者移植后MRD监测。可在患者血液学复发前的6~24个月骨髓检测就呈阳性。 RQ-PCR还能动态观察患者治疗后BCR-ABL转录本水平变化情况，反映疗效。 MLL相关融合基因 累及MLL基因的分子异常见于5.2%AML，22%ALL和混合性白血病及某些淋巴瘤，还可见于治疗相关白血病，尤接受topoisomerase II抑制剂治疗的患者 MLL基因涉及五十余种染色体易位，产生不同的融合蛋白，且每种融合蛋白都与特定的白血病表型相关。最常见的有： t(4;11)(q21;q23) MLL-AF4融合基因 ALL t(9;11)(p22;q23) MLL-AF9融合基因 AML t(11;19)(p13;q23) MLL-ENL融合基因 AML及ALL 血液病临床分子标志物检测(NHL ALL) 淋巴系统白血病 Acute lymphoblastic leukemia (急性淋巴细胞白血病) Lymphoproliferative disorders （淋巴性增生性疾