肿瘤标志物化学发光免疫芯片制备及其利用研究.pdfVIP

摘要 摘要 肿瘤标志物对于肿瘤的早期诊断、疗效监控以及指导治疗具有重要意义，而 实现对肿瘤标志物的灵敏、高效检测是发挥肿瘤标志物作用的关键所在。本论文 主要围绕肿瘤标志物的化学发光免疫芯片的构建以及多种肿瘤标志物同时检测 方面开展工作。具体研究内容如下： (1)构建单一肿瘤标志物的化学发光免疫检测芯片，并实现对癌胚抗原 (CEA)的定量检测。玻璃基片用酸预处理，使其充分暴露玻片表面的羟基，然 后用7．(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷(GPMS)进行硅烷化处理，得到环氧端 基修饰的玻璃基质，该基质可与CEA抗体分子中赖氨酸残基上的活性氨基反应 从而将CEA抗体分子固定在基片表面构建出CEA检测芯片；通过夹心免疫反应 将待测CEA抗原以及碱性磷酸酶(ALP)酶标二抗结合到芯片表面，利用ALP 酶对于发光底物的催化作用实现对CEA的定量检测。CEA的检测线性范围为 O．5．120斗g／L，线性相关系数R=0．9968。 抗体的有序同时固定，构建用于胰腺癌两种标志物同时检测的化学发光免疫检测 芯片，实现对两种模板蛋白的同时检测，CEA和CAl9—9的检测限分别达到0．41 kU／L。本文除了对芯片进行化学发光检测外，还进行了显色检测， 斗g／L以及O．36 为肿瘤标志物的定量检测提供了新的思路。 关键词：肿瘤标志物，化学发光，免疫分析，芯片，同时检测 Abstraet Abstract Tumormarkersan rolein andevaluationof play importantearlydiagnosis treatmentfor tumor-associated and patients谢tIl diseases，andreliable，sensitive these markersandadesirableevaluationare efficienttestsof tumor systemvery this wefocusedonthefabricationof significant．Inpaper andthesimultaneous detectionoftumormarkers． immunoassaychips multianalyte forthedetectionof (1)Asingle-analyteassaychip(ShhC)wasprepared slideswere acid glass pretreated、析th carcinoembryonicantigen(CEA)．Firstly,the solutioninorderto all numberof onthesurface． adequate hydroxylgroups possess withthe coupled hydroxylgroups Then,1-glycidoxypropyltrimethoxy(GPMS)Was toforma and onthe