结核病防治实验室痰检工作——第二讲 显微镜读片检查PPT.ppt

* * 第三章 结核病管理及最新进展 第一节 结核病防治实验室痰检工作 贵州省疾控中心结核病防治研究所袁 薇 第二讲 显微镜读片检查 准备知识 显微镜简图 操作步骤 镜油 显微镜读片检查 显微镜读片 玻片的保存 废弃物的处理 痰涂片镜检质量保证 质量保证 质量控制 本节内容导航 室间质量评估 EQA的组织工作和关键技术措施 推行EQA 现场评价—内容 实验室基本要求－布局 生物安全 盲法复检 批量测试 质量提高 本节内容导航 操作步骤 准备知识 镜油（immersion oil)替代香柏油 香柏油易干燥凝结，损害油镜头 使用擦镜纸清洁物镜，避免用二甲苯 擦拭物镜 易损坏镜头 对人体有害 准备知识 镜油 显微镜读片 读片时，首先从痰膜一端由左至右观察相邻的视野 当玻片移动到痰膜的另一端时，纵向向下转换一个视野 然后从右向左观察 避免跳跃或者闭合 环状路线 显微镜的读片检查 红色、杆状、略弯曲 显微镜的读片检查 显微镜读片 “V”- 字形 显微镜读片 显微镜的读片检查 成簇的抗酸菌 显微镜的读片检查 显微镜读片 在淡蓝色背景下，抗酸杆菌呈红色，其它细菌和细胞呈蓝色镜检报告：涂片结果报告标准(萋－尼氏抗酸菌染色法) 显微镜读片 显微镜的读片检查 阴性 300 视野 0条 报告菌数 300 视野 1～8条 阳性1＋ 100视野 3～9条 阳性2＋ 10视野 1～9条 阳性3＋ 每视野 1～9条 阳性4＋ 每视野 10条 玻片的保存 如果使用显微镜附带的镜油，或者是购买的镜油（immersion oil），而不是香柏油（cedar oil），则不需使用二甲苯，直接使用镜头纸擦拭即可 干燥后的玻片，按实验室序号及涂片编号放置在玻片盒中，存放在阴凉干燥环境中。处于潮湿炎热的环境中抗酸菌易于褪色 显微镜的读片检查 玻片的保存 镜检后的玻片上只注明实验序号，不得标注镜检结果 全部涂片按实验序号连续排列保存 显微镜的读片检查 显微镜的读片检查 玻片的保存 废弃物的处理 污染源：所有可能与生物危险物接触或被污 染的试验器械和物品 ，例如痰标本 涂抹后的 竹签 涂片 手套 口罩帽等 废弃物处理方法 高压灭菌 :高压灭菌是首选的处理方法 显微镜的读片检查 1 废弃物的处理 焚烧:如果没有焚烧炉，简单的燃烧是难以彻底 杀灭病菌，可能会使病菌扩散 化学消毒剂处理：避免使用化学消毒剂处理废弃 污染物就直接将其丢弃，很难保证杀灭效果,痰 液中的蛋白等物质对消毒剂的杀灭效果影响很大 显微镜的读片检查 2 3 废弃物处理 传染性废弃物对实验员和环境危险性极大 在废弃物离开实验室前必须高压灭菌或去污染处理 对溅出的标本应以5%石炭酸或者氯制剂进行消毒 酚类对标本有效 75% 酒精：只能皮肤消毒、或擦拭桌椅、台面 （注意防火） 显微镜的读片检查 痰涂片镜检质量保证 中国结核病防治规划---- 痰涂片镜检质量保证手册 结核病防治规划 系统网络 质量控制 质量检查和评估 提高业务水平 痰涂片镜检质量保证 质量保证 是能持续提高实验室服务效率和可信度的体系，包括室内质量控制、室间质量评估和质量提高 质量控制 现场评价 质量保证 室间质量评估 盲法复检 质量提高 批量测试 痰涂片镜检质量保证 质量控制 也称室内质量控制：指实验室内部对实验室服务整个过程各个环节的内部检查和监测 质量控制措施 日常工作的自我监督 染色液的质控 质量控制 现场评价 质量保证 室间质量评估 盲法复检 质量提高 批量测试 痰涂片镜检质量保证 涂片制备和染色、显微镜维护、显微镜镜检、结果登记和报告、以及痰片保存等 涂片的自查或互查 各种工作应有详尽记录 包括：操作规程、设备和耗材、痰标本收集、染色剂制备 质量控制 痰涂片镜检质量保证 质量控制措施 室间质量评估 室间质量评估（EQA）是根据与其它网络实验室（中间级实验室和中心实验室）比较批量测试和盲法复检结果评价基层实验室能力的过程 EQA包括实验室现场评估以评价操作质量并且也包括现场对涂片的复读。EQA是国际肺病和防痨联合会描述的熟练度检测的扩大 质量控制