SMAF1基因的异位过表达对脂肪细胞3T3L1增殖与凋亡的影响.docVIP

SMAF1基因的异位过表达对脂肪细胞3T3L1增殖和凋亡的影响 （作者:___________单位: ___________邮编: ___________） 作者：韩威 段佳慧 吴民泸 林泽超 刘彦华 【摘要】 目的 观察一脂肪细胞特异性表达的新基因小脂肪细胞因子1(SMAF1)在小鼠脂肪前体细胞3T3L1中的异位表达对脂肪细胞增殖和凋亡的影响。方法 构建小鼠SMAF1真核表达载体并稳定转染3T3L1脂肪前体细胞以获得永久异位表达SMAF1基因的细胞株，使用Western blot证实SMAF1基因的表达。体外培养SMAF13T3L1脂肪细胞，以MTT法检测SMAF13T3L1脂肪细胞的增殖;用流式细胞仪对SMAF13T3L1脂肪细胞进行凋亡分析。结果 与对照相比，SMAF13T3L1脂肪细胞增殖明显降低，差异有统计学意义(P0.05);而SMAF13T3L1脂肪细胞凋亡分析结果与对照无显著性差异。 结论 SMAF1基因在3T3L1中的异位性表达，对3T3L1前体脂肪细胞生长增殖有显著的抑制作用，而对细胞凋亡无影响，提示SMAF1在脂肪细胞增殖分化中发挥一定的作用。 【关键词】 SMAF1; 脂肪细胞; 异位表达; 增殖; 凋亡 【Abstract】 Objective To evaluate the effect of a novel adipocytespecific expressed gene small adipocyte factor 1 (SMAF1) on proliferation and apoptosis of preadipcyte 3T3L1. Methods A permanent SMAF1 expression construct was established for stable transfection of 3T3L1 and formation of SMAF1 3T3L1 cell line. After invitro culturing of cells,both MTT method and flow cytometry were used to detect and analyze the proliferation level and apoptosis progress respectively. Results Compared with control groups,SMAF1 3T3L1 cell line showed remarkable reduction in proliferation with statistical significance (P0.05),while no notable difference in apoptosis between two cell lines. Conclusion The ectopic expression of SMAF1 in 3T3L1 preadipocyte might suppress proliferation without interfering apoptosis process.【Key words】 small adipocyte factor 1; preadipocytes; ectopic expression; proliferation; apoptosis 　　肥胖症与遗传、中枢神经系统异常、内分泌功能紊乱、代谢因素和营养因素不平衡等密切相关。1994年Zhang 等成功克隆了肥胖基因(ob gene，现称为瘦素基因)，并发现其表达产物瘦素(leptin)[1];1995年，Tartaglia 等成功克隆了瘦素受体基因。迄今为止已陆续发现了许多对肥胖有决定作用的基因[2]。2005年，Ronald Kahn等发现了褐色脂肪细胞早期发育所必需的基因网络(374个基因)，并进一步证实了在胰岛素信号和褐色脂肪细胞控制之间存在着联系，这一基因网络的完整构成的发现，为肥胖症和糖尿病的临床检验和治疗提供了一个重要蓝图[3]。最近研究显示，在小鼠脂肪组织基因芯片筛选中，发现了一个异于其他蛋白质家族的具有约700碱基对/80氨基酸序列的潜在肥胖基因SMAF1——小脂肪细胞因子1(small adipocyte factor 1)[4]。SMAF1基因仅在脂肪细胞中特异性表达，在大鼠和小鼠培养的原代脂肪前体细胞中表达缺失;SMAF1基因表达和脂肪细胞基因表型呈现密切相关;不仅如此，SMAF1基因在脂肪细胞中的mRNA水平和脂肪细胞成熟分化程度呈正相关。但目前对SMAF1基因在脂肪细胞增殖和凋亡过程中所起的作用尚不清楚。本研究主要以SMA