一轮复习：细胞中的脂质和糖类、脂肪的鉴定.pptVIP

* 翠园中学生物组 细胞中的脂质及糖类、脂肪的鉴定 氾水高中 陈军 2013.6.6 　生物组织中还原性糖、脂肪的鉴定 【知识拓展】 某些化学试剂能够使生物组织中的有机化合物产生特定的颜色反应。 一、实验原理 二、实验流程 1．还原性糖的鉴定 2．脂肪的鉴定 三、本实验成功的关键： 1．实验材料的选择 (1)可溶性还原糖的鉴定实验中，最理想的实验材料是还原糖含量较高的生物组织(或器官)，而且组织的颜色较浅，易于观察。可选用苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。 (2)脂肪的鉴定实验中，实验材料最好选富含脂肪的生物组织(或器官)，若利用显微镜观察，则最好选择花生种子。如果是新鲜花生种子，可不必浸泡，浸泡后效果反而不好；如果是干种子，需浸泡3～4h最适宜切片(浸泡时间短，不容易切片；浸泡时间过长，组织太软，切下的薄片不易成形)。 2．实验操作中的注意事项 (1)还原糖、蛋白质的鉴定实验中，在加相应试剂鉴定之前，要留出一部分组织样液，以便与鉴定后的样液颜色作对比，增强实验的说服力。 (2)在蛋白质的鉴定实验中，如果用蛋清稀释液作为实验材料，一定要稀释到一定程度，否则，与双缩脲试剂发生反应后会粘在试管的内壁上，使反应不彻底，试管也不易洗刷干净。 3．斐林试剂与双缩脲试剂比较 样液变紫色 样液变砖红色 反应现象 不需加热，摇匀即可 水浴50～65℃加热 反应条件 先加入A液1mL，摇匀，再加入B液4滴，摇匀 甲乙两液等量混匀后立即使用 添加 顺序 蛋白质 可溶性还原糖 鉴定 物质 0.01g/mL CuSO4溶液 0.1g/mL NaOH溶液 0.05g/mL CuSO4溶液 0.1g/mL NaOH溶液 成分 B液 A液 乙液 甲液 双缩脲试剂 斐林试剂 (1)浓度不同。斐林试剂中CuSO4溶液浓度为0.05g/mL，双缩脲试剂中CuSO4溶液浓度为0.01g/mL。 (2)原理不同。斐林试剂的实质是新配制的Cu(OH)2溶液；双缩脲试剂实质是碱性环境中的Cu2＋。 (3)使用方法不同。斐林试剂是先将NaOH溶液与CuSO4溶液混合后再使用；双缩脲试剂是先加入NaOH溶液，再滴加CuSO4溶液。 现象 试剂 淀粉 蛋白质 脂肪 还原糖 1、实验原理比较 斐林试剂 苏丹Ⅲ/苏丹Ⅳ 双缩脲试剂 碘液 砖红色 橘黄色/红色 紫色 蓝色 2、斐林试剂与双缩脲试剂的比较 双缩脲 试剂 斐林 试剂 反应实质 使用方法 试剂成分 0.1g/mlNaOH 0.05g/mlCuSO4 0.1g/mlNaOH 0.01g/mlCuSO4 先混合再加入，需加热 依次加入，不需加热 Cu(OH)2被还原 碱性条件下Cu2+与肽键反应 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 斐林试剂 双缩脲试剂 甲液： 乙液： A液： B液： 0.1g/ml的NaOH溶液 0.05g/ml的CuSO4溶液 0.1g/ml的NaOH溶液 0.01g/ml的CuSO4溶液 混合均匀现配现用加热 先A后B 注意事项： 3、实验材料的比较 材料 蛋白质 脂肪 还原糖 苹果、梨 花生种子 鸡蛋清、豆浆 4、还原糖的鉴定 在糖类中，分子中含有游离醛基或酮基的单糖和含有游离醛基的二糖都具有还原性，因此叫还原性糖，而蔗糖的分子中没有，因此叫非还原性糖。 斐林试剂（淡蓝色的Cu(OH) 2）与还原糖在加热的条件下，生成砖红色的Cu2O沉淀。如用50-650C水浴加热，Cu2O沉淀颗粒较大，呈现砖红色；如用酒精灯直接加热，Cu2O沉淀颗粒较小，呈现黄色。 还原性糖:葡萄糖、核糖、脱氧核糖、半乳糖、乳糖、果糖、麦芽糖。 非还原性糖：蔗糖、纤维素、淀粉。 *