与基因沉默课件
次日,离心分离培养液,然后将沉淀重悬于渗透培养基中,烟草的浓度OD600=1.0 ,西红柿的浓度OD600=2.0,室温下培养2-3h。 按1:1混合含有pTRV1和pTRV2的根癌农杆菌液悬液。用一个注射器将混合悬液移到叶子下表面,接着用刀片切开一个约0.1mm的切口,压注射器顶端使液体进入叶子,同时用一个手指压在叶子另一面起支撑作用。大约培养3周后再用混合悬液渗透处理处于四叶期烟草和三叶期西红柿的下面两片叶子。 为了更有效地沉默西红柿,用喷雾器在西红柿叶子上喷洒混悬液,以75psi压力从约8英尺远处喷约1秒钟。在烟草渗透处理后5天能见到PDS沉默,西红柿可在10天后见到。 5.总结 植物基因沉默的几种模式: 第八章动物中的转基因共抑制 随着研究的不断深入,人们将共抑制分为两类。一类是转基因与RNA编码部分区域有同源性,这种情况RNA能够正常转录,但是却不能正常的翻译,这是共抑制的一种类型――转录后沉默;一类是导入的转基因与启动子区有同源性,当导入基因时增加了同源区的甲基化,降低了RNA的转录――转录沉默。 在对植物的研究中发现,植物病毒的转基因表达能够有效抑制同源病毒的复制,在植物中的病毒转基因的表达部分对同源病毒的抑制类似于已知的转录后基因沉默,这让人
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