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2.2.1动物细胞培养和核移植技术 （一）、概念 是指从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 （三）、过程 讨论 1、无菌、无毒的环境 3、温度和PH 植物组织培养和动物细胞培养的比较 细胞接触抑制 5、动物细胞培养的特点 （ ） ①细胞贴壁 ②有丝分裂 ③细胞分化 ④接触抑制 ⑤减数分裂 ⑥原代培养一般传1－10代 A、①②④⑥ B、②③④⑤ C、①③④⑥ D、③④⑤⑥ A 6、下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答： （1）容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自______________________。 （2）容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是 ，然后用 酶处理，这是为了使细胞分散开来，这样做的目的是 。 动物胚胎或幼龄动物 剪碎 胰蛋白 使细胞与培养液充分接触，便于培养 （3）培养首先在B瓶中进行，瓶中的培养基成分有 ________________等。在此瓶中培养一段时间后，有许多细胞衰老死亡，这是培养到第 代，到这时的培养称为__ 。 （4）为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中，用 处理，然后配置成 ，再分装。 ` 动物血清 10 原代培养 胰蛋白酶 细胞悬浮液 * * * * 烧伤病人图片 治愈后图片 专题2.2动物细胞工程 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体制备 细胞核移植 动物细胞工程技术 动物细胞工程的基础 （二）、原理 细胞分裂增殖 幼龄动物 剪碎组织 胰蛋白酶处理 单个细胞 原代细胞培养 取动物器官 和组织 细胞悬浮液 传代细胞培养 归纳 过程 取 的组织、器官 细胞悬浮液 酶 贴满瓶壁的细胞 单个细胞 加入 液 动物胚胎或幼龄动物 胰蛋白 培养 接触抑制 原代 培养 1-10代细胞 遗传物质 改变 原代细胞 培养 加 液 10—50代细胞 未 遗传物质 改变 无限传代 已 传代培养 胰蛋白 酶 思考题： 1、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？ 2、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？ 因为这些组织或器官，分裂能力旺盛，易于培养。 成块组织使细胞靠在一起限制了细胞的生长和增殖，且细胞不能与培养液充分接触，不利于培养。 3、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？ 催化蛋白质水解。细胞间的物质主要是蛋白质(胶原蛋白等)。 4、细胞膜的主要成份是什么？ 蛋白质和磷脂 5、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？ 能 6、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？ 7、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？ 注意时间的控制 不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近 对于多细胞生物来说，细胞都生活在内环境中，根据你所学的知识，认为体外培养细胞应该需要什么样的条件？ 保证细胞顺利的生长增殖 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。） （四）、动物细胞培养的条件 2、营养 培养室中控制,使之达到 36.5 ± 0.5℃, 7.2~7.4 培养箱中提供O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 4、气体环境： 植物体 培养结果 获得 快速繁殖、培育无病毒植株 培养目的 葡萄糖、 、植物激素 培养基特有成分 细胞 细胞的 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 全能性 增殖 蔗糖 动物血清 细胞株、细胞系 细胞 （五）、动物细胞培养技术的应用 （3）细胞的生理、药理、病理研究 （1） 培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植 （2） 基因工程的受体细胞 多莉的诞生.swf （一）、动物细胞核移植的概念： 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移如入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体. 克隆动物：用核移植的方法得到的动物。 （二）、分类： 胚胎细胞核移植： 体细胞核移植： 细胞分化程度低，恢复 全能性容易 细胞分化程度高，恢复 全能性困难 去核卵母细胞 供体 细胞 电刺激使 两细胞融合 重组细胞 重组胚胎 新个体 代孕母牛C 胚胎移植 卵母细胞培养 思考：克隆牛的生殖方式是什么？ 无性生殖 （三）