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生物技术1001 第六组实验报告实验一：热带假丝酵产SCP发酵过程的分析
生技1001班 第组实验报分工：
实验一：热带假丝酵母产SCP发酵过程的分析
一、实验目的
单细胞蛋白（SCP)含有丰富的氨基酸、还原糖等物质。本实验对四种培养基分别培养的热带假丝酵母产SCP发酵过程的分析，掌握发酵过程有关参数的测定和分析方法。
二、材料和方法
菌种：热带假丝酵母，发酵摇床等各种仪器。
四种培养基：碳源分别是葡萄糖（P)、麦芽糖(M）、蔗糖（Z）、水（不含任何糖），蛋白胨、MgSO4、KH2PO4、pH自然。
分析测定项目：发酵液菌体干重、还原糖量、NH2-N。
（2）实验测得：P(葡萄糖)、M（麦芽糖）、Z（蔗糖）、不加糖的OD540分别为：0.773、0.752、0.592、0.454
根据发酵液的稀释倍数和标准曲线可得原发酵液葡萄糖的浓度分别为：26.470mg/ml、25.844mg/ml、21.079mg/ml、16.968mg/ml
2.发酵液中菌浓的测定
（1）发酵液菌浓度-OD700标准曲线的制作
m-OD700表
OD700（稀释100倍）
0
0.138
0.129
0.235
0.205
0.276
0.254
0.345
0.334 10ml发酵液菌体干重(g)
0
0.1106
0.1082
0.1639
0.1546
0.1981
0.1934
0.2244
0.2133
（2）实验测得：P(葡萄糖)、M（麦芽糖）、Z（蔗糖）、不加糖的OD700（1ml稀释20倍)分别为：0.844、0.504、0.597、0.472
根据发酵液的稀释倍数和标准曲线可得原发酵液菌体浓度分别为：23.9615g/L、13.2207g/L、16.1586g/L、12.2098g/L
发酵液NH2-N的测定
糖类
体积 Z（蔗糖） P(葡萄糖) M（麦芽糖） 不加糖 V1/ml 3.00 3.60 4.51 5.33 V2/ml 3.60 4.51 5.33 5.96 V=V2-V1(ml) 0.60 0.91 0.82 0.63 根据公式：
可得：P(葡萄糖)、M（麦芽糖）、Z（蔗糖）、不加糖的NH2-N含量分别为546mg/100ml、492mg/100ml、360mg/100ml、378mg/100ml.
五、实验结果分析
（1） 结果总表
P(葡萄糖M(麦芽糖Z(蔗糖水（没加任何糖）
由比较柱形图可知：该菌体利用葡萄糖、麦芽糖、蔗糖的能力依次递减，发酵产生的菌体数量递减，产生的单细胞蛋白递减。
六、思考题
1、测菌浓的方法?
答:（1）重量法,即干重与湿重法。
（2）比浊法。铁氰化钾法，蒽铜比色法
还原糖、总糖测定方法区别在于：测总糖时，要先酸水解、酶成还原糖再进行测定。所以总糖测定可在还原糖的测定方法基础上，用酸水解法、酶水解法水解成还原糖，再换算。NH4+的测定基于这个离子本身，而氨基氮（NH2-N) 指的是各种氨基化合物(主要是氨基酸)中所含氮的总量。将各种含氮化合物转化为NH4+，测定NH4+量，即可得到氨基氮（NH2-N) 的含量。靛酚蓝-分光光度法
凯氏定氮法离子色谱仪
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