CD44s和Mib—1在星形胶质细胞瘤中表达及其临床意义.docVIP

CD44s和Mib—1在星形胶质细胞瘤中表达及其临床意义 　　[摘要] 目的 探讨CD44s和Mib-1在星形胶质细胞瘤中的表达及其临床意义。 方法 采用免疫组织化学ABC法检测41例不同级别星形胶质细胞瘤标本中CD44s和Mib-1的表达，并与肿瘤恶性程度及预后做相关分析。 结果 高级别胶质瘤中CD44s及Mib-1的表达均高于低级别胶质瘤（P = 0.008、0.002）。CD44s与Mib-1表达呈正相关（P 　　[关键词] 星形胶质细胞瘤；CD44s；Mib-1；免疫组织化学 　　[中图分类号] R739.4 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2013）06（b）-0004-04 　　星形胶质细胞瘤是常见的颅内原发性肿瘤。虽然低级别的星形胶质细胞瘤较高级别的生长缓慢，但却能向高级别进展。目前世界卫生组织对星形胶质细胞瘤的分类法在预计临床预后及生存率方面仍然存在许多缺陷。从分子水平上诊断、评估预后比从组织病理学上更加精确[1]。其中细胞表面黏附蛋白CD44s及细胞增殖相关蛋白Mib-1引起了人们广泛的关注[2-3]。本研究对星形胶质细胞瘤标本中CD44s和Mib-1的表达进行检测，并初步探讨其在诊断及判断预后中的临床意义。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　41例胶质瘤标本取自1998年1月～2005年12月的手术患者。其中，男性27例，女性14例，年龄6～79岁，平均（39.0±21.4）岁。术中肿瘤切除后，一部分立即放入液氮保存，余下组织予10%甲醛固定，石蜡包埋后做常规HE染色。根据世界卫生组织中枢神经系统肿瘤分类方法将所有标本进行分类，其中，星形细胞瘤Ⅰ级11例，星形细胞瘤Ⅱ级9例，星形细胞瘤Ⅲ级11例，胶质母细胞瘤Ⅳ级10例。随访采集数据为无进展生存时间（progression-free survival，PFS），即从患者术后起至肿瘤复发的时间。 　　1.2 免疫组织化学染色 　　免疫组织化学染色采用抗生物素蛋白-生物素-过氧化物酶复合物（ABC）法。切片用4%多聚甲醛常温固定30 min，3%H2O2、0.3% Triton X-100常温下浸泡30 min，10%封闭血清常温下浸泡60 min。PBS冲洗后一抗孵育过夜。之后按ABC VectastainR试剂盒说明书操作。最后苏木精复染，封片镜检，计算阳性细胞标记率百分比。用脾脏、胰腺、乳腺癌组织以及胶质母细胞瘤细胞系作为阳性对照，PBS代替一抗作为阴性对照。随机选择10个视野，高倍镜下观察500～1000个细胞，计数阳性细胞，以百分数表示蛋白标记指数（labelling index，LI）。坏死区、血管内皮细胞不计算在内。 　　1.3 统计学处理 　　应用软件为SPSS 16.0统计软件。低级别组（Ⅰ、Ⅱ级）与高级别组（Ⅲ、Ⅳ级）之间蛋白标记指数采用独立样本t检验；CD44s与Mib-1相关性采用Spearman相关分析；预后采用Kaplan-Meier生存曲线进行比较，界值取样本标记率中位值。 　　2 结果 　　2.1 CD44s和Mib-1的表达与肿瘤病理级别的关系 　　CD44s是一种跨膜细胞表面黏附蛋白，Mib-1是一种核蛋白。随着肿瘤组织病理级别增高，两者阳性细胞的免疫组织化学染色越深（图1、2）。低级别组（Ⅰ、Ⅱ级）的CD44s LI平均值为1.42±1.69，高级别组（Ⅲ、Ⅳ级）的CD44s LI平均值为6.69±8.06，两组差异有统计学意义（t = -2.929，P =0.008）。低级别组（Ⅰ、Ⅱ级）的Mib-1 LI平均值为1.70±2.05，高级别组（Ⅲ、Ⅳ级）的CD44s LI平均值为6.17±5.59，两组差异有统计学意义（t = -3.429，P = 0.002）。 　　2.2 CD44s和Mib-1表达的相关性 　　经Spearman相关性分析表明，CD44s和Mib-1呈正相关（P 　　CD44s与预后之间的关系也存在很多分歧，Buccoliero 等[16]认为CD44s可作为胶质瘤的一项预后指标，而Ranuncolo等[15]则认为CD44s不能作为一项预后的预测指标。在结肠癌中，CD44s及其他亚型的高表达均预示预后不良[17]。而在许多肿瘤患者中CD44表达越低，生存时间越短[6，18-19]。Wei等[20]发现胶质母细胞瘤患者CD44s表达越高预后越好。 　　本研究的结果显示星形胶质细胞瘤中高级别组CD44s标记指数显著高于低级别组，提示CD44s表达与肿瘤病理分级密切相关。同时CD44s高表达组PFS显著低于低表达组，提示CD44s表达与肿瘤患者预后相关（P = 0.023），可作为预测其预后的一项指标。Khoshyomn等[21]发