生物课件3免疫球蛋白基因和基因工程抗体.ppt

1、抗体（antibody, Ab) 抗原刺激B细胞后分化增殖为浆细胞合成和分泌的, 能与抗原发生特异性结合并具有多种免疫功能的球蛋白。 2、免疫球蛋白 (immunoglobulin，Ig) 将具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白，统称为免疫球蛋白。 包括骨髓瘤、巨球蛋白血症等患者血清中尚未证实有抗体活性的异常免疫球蛋白、免疫球蛋白亚单位等。 3. Ab与Ig的区别 第二节 免疫球蛋白的结构 一、基本结构 由四条多肽链 (重链及轻链各两条) 经二硫键连接起来 (一)重链（heavy chain) 分子量55～75KD，由420-460个氨基酸组成。 根据重链特性的不同，可将其分为α、γ、μ、δ、ε五种。 据此将免疫球蛋白分为五类。 N端第1个功能区为重链的可变区(variable region of heavy chain, VH) VH中的31-35、50-65、95-102段为超变区（hyper variable region, HR) CH1：遗传标志 CH2：与补体活化及通过胎盘有关 CH3：固定组织细胞 CH3与CH4：可与Fc受体结合 绞链区的作用 (二) 轻链 可分为κ链及λ链两种。 同一单体中两条轻链是相同的，但不同的分子中其组成不同，人体内免疫球蛋白中κ链占65%，λ链占35%。 功能区: 可变区(VL):超变区及抗体互补决定区 恒定区(CL) 二、酶解片断 1. 木瓜酶 单体绞链区，水解产物为 2个Fab片段及一个Fc片段。 Fab片段(抗原结合片段):含有一条完整的轻链及重链的一部分，能与相应抗原特异结合，但是单价性的（只能结合抗原，不能凝集或沉淀）。 Fc片段(可结晶片段):不能与抗原结合，但具有多种生物学活性，结合补体、固定细胞、通过胎盘等。 2. 胃蛋白酶 作用于绞链区的第一个二硫键的下方酶解后形成F(ab’)2及pFc两个片段。 F(ab’)2：是两个Fab由一个二硫键结合在一起形成的双体，经还原后便分解为两个Fab，F(ab’)2具有双价抗体活性,与抗原结合后能形成沉淀或凝集。 pFc：小分子肽，不具有任何生物学活性。 三 免疫球蛋白的血清型 免疫球蛋白生化本质上属于大分子蛋白质（具有抗体活性及表位） 根据其本身具有的多种抗原决定簇(表位） 可采用血清学方法(相应的抗体)加以鉴定，称为免疫球蛋白的血清学类型 同种型、同种异型和独特型 （一）、同种型 同一种系的所有个体的免疫球蛋白所共有的抗原特异性。 根据免疫球蛋白H链的抗原决定簇不同，可分为不同的类、亚类。 根据L链的抗原决定簇不同，将其分为型及亚型。 1、 类与亚类 根据CH链结构的差异可将免疫球蛋白分为IgG、IgA、IgM、IgD、IgE五大类, 每大类又可以分为若干个亚类。 2、 型及亚型 根据免疫球蛋白CL链的结构可将免疫球蛋白分为κ及λ两个型。 （二）、同种异型 同种系的不同个体之间,同一类、亚类、型、 亚型的免疫球蛋白，在结构上可能会有一个或数个氨基酸的差异, 称为同种异型。 反应在CH、CL上一个或数个氨基酸的差异，是由不同个体的遗传基因决定的，又叫遗传标志。 IgG1,IgG2,IgG3重链的遗传标志称为Gm因子， 位于CH1－CH3之间。 Am因子：IgAα2链；Km因子： κ链。 （三）、独特型 同一个体内不同的B细胞产生的免疫球蛋白,由于重链及轻链的可变区 (尤其是超变区)氨基酸组成的差异, 导致的抗原特异性为Ig的独特型。 独特型网络 一、Ig M 二、Ig A 血清型: 单体结构 分泌型: 由J链连接的双体再加上一个分泌片组成。分泌片可以保护粘膜分泌液中蛋白酶对其的破坏作用。 三、Ig G、IgD、IgE 五、Ig的功能 一、结合抗原 抗原抗体特异性结合 B细胞表面抗原受体（膜抗体） 二、结合补体 三、结合Fc受体 四、具有抗原性 一、免疫球蛋白基因的结构特点 由?、?和重链三组基因群控制。基因群中含有许多基因节段(segment)。 Vk Jk 氨基酸 CCXCCC TGGACG P W T CCXCCC TGGACG P T CCXCCC TGGACG P P T CAG CCG GAT CAG CAG CGA TCA G CAGCCTTGGACG CAGCCTAGTTTCTGGACG 用基因工程技术制备的抗体和抗体片段称为基因工程抗体(genetic eng