梅毒的实验室诊断及其临床应用1ppt课件.pptVIP

安徽省立儿童医院检验科 一、概述 梅毒螺旋体即苍白密螺旋体的苍白亚种，人是其唯一宿主。直径0.1—0.15μm，全长7--8μm。在电镜下可见有细胞壁和细胞膜。新鲜标本在暗视野显微镜下可观察其形态和活泼的运动方式。 梅毒螺旋体对外界的抵抗力极弱，离体后1-2小时即死亡，对热和干燥特别敏感，40℃～60℃时2 ～3分钟就能死亡，100℃时则即刻死亡。血液中4℃放置3天可死亡，因此4℃血库存放3天以上的血液无传染梅毒的危险。对肥皂水和常用化学消毒剂亦敏感，1%--2%石炭酸内数分钟就死亡；对化学药品也很敏感，肥皂水、来苏水、1∶1000的高锰酸钾液对它都有杀灭作用。但是在缺氧的环境下它能生存数天，在潮湿的衣服上也能存活数小时。了解了梅毒螺旋体的特性，我们就可以针对其弱点将它消灭。如将衣物放于阳光下曝晒，放在干燥的环境中储存；将用具煮沸消毒或用化学用品消毒，都能杀灭梅毒螺旋体，阻止它的传播。 梅毒螺旋体主要有两种抗原：1、密螺旋体抗原即梅毒螺旋体表面的特异抗原，与雅司病（皮肤损伤）、地方性梅毒（粘膜损伤） 、品他病（皮肤损伤）等3种密螺旋体有共同抗原，可交叉反应。2、非螺旋体抗原即磷脂类抗原，可刺激机体产生反应素，其与牛心肌的心脂质抗原发生反应，此法敏感性高，但有假阳性。 梅毒的免疫属感染性免疫，有梅毒螺旋体感染时才有免疫力，一旦螺旋体被杀灭，其免疫力随之消失。机体对梅毒螺旋体感染可产生细胞免疫和体液免疫反应，体液免疫中有两种抗体：一种是梅毒特异性抗体，主要是IgG、IgM，对螺旋体有制动作用，当有补体存在时，可将其杀死和溶解，对机体的再感染有保护作用。另一种是抗脂质抗体的反应素，为IgG和IgM的混合物，对机体无保护作用。 梅毒主要是通过性接触传播，占95%以上，还可以通过胎盘传播给下一代，发生胎盘梅毒。还有一些比较少见的感染途径，如接吻、哺乳 等，此外输血也可以传播 。 二、临床表现及其分期 梅毒其病程漫长，临床表现极为复杂，几乎可侵犯全身各种组织和器官，可反复发作。早期主要侵犯皮肤黏膜，晚期侵犯内脏器官，严重者可引起严重的心血管系统和神经系统损害。 临床上分为获得性梅毒（后天梅毒）和先天性梅毒（胎盘梅毒），获得性梅毒根据其发展经过一般分为三期。 一期梅毒：一般在感染后的3周发生，主要表现为硬下疳。 二期梅毒：发生于感染后的6-8周。主要表现为全身皮肤粘膜出现梅毒疹。 三期梅毒：发生于感染后的2年，可出现皮下树胶肿（梅毒瘤）、神经梅毒、心血管梅毒。 三、实验室诊断 （一）、显微镜检查：直接观察分泌物中的梅毒螺旋体，如见到运动活泼的苍白螺旋体可直接诊断梅毒，是最特异、最准确的诊断方法，但灵敏度低。 暗视野显微镜检查（DF） 直接免疫荧光检查 镀银染色法 多功能显微诊断仪（MDI） 暗视野显微镜检查（DF） 是诊断早期梅毒唯一可靠的实验室方法，特别是血清学反应阴性者，镜检阳性有确诊意义，可直接观察到病灶分泌物中的梅毒螺旋体。该方法不仅操作简单，且经济 、快速，但此法对晚期及隐性梅毒或口腔病灶标本不适用。 Ⅰ期梅毒--取硬下疳渗出液； Ⅱ期梅毒--取梅毒疹渗出液或局部淋巴抽出液。 对Ⅰ期梅毒末期以后（大约感染3-4周以后）的病人可分离血清检查有无梅毒螺旋体抗体和反应素。 直接免疫荧光检查 弥补了DF的缺点，可用于口腔病灶的检查。 镀银染色法 梅毒螺旋体染成棕黑色，背景染成淡棕色。银染色的阳性结果需谨慎解释，因为类似梅毒螺旋体的其他物质易混淆。 多功能显微诊断仪（MDI） 是近年来国外开发的一种综合相差对比、暗视野及偏振光的可变投影显微镜，其特点是待检查标本不需染色及任何加工处理，而是将“活的”真实的样品直接进行观察，具有直接、方便、快速的优点。但整套仪器价格昂贵，很难普及到各个梅毒检测实验室。 镀银染色法 梅毒螺旋体染成棕黑色，背景染成淡棕色。 （二）、血清学实验 是诊断梅毒的主要方法 根据所用抗原不同可分为两类： 非梅毒螺旋体抗原血清试验 梅毒螺旋体抗原血清试验 非梅毒螺旋体抗原血清试验 原理 梅毒螺旋体破坏宿主细胞释放类脂物质，同时它自己细胞表面也可以释放这种类脂物质，类脂物质刺激机体产生抗类脂抗体（抗心磷脂），在体外该抗体与心磷脂、卵磷脂和胆固醇组成的抗原反应，形成凝集反应（抗原抗体凝集反应）。 目前为多数医院的梅毒常规筛查试验。这类试验可观察疗效、复发及再感染，适于二期梅毒的诊断，而不适于诊断一、三期梅毒，包括潜伏梅毒、神经梅毒的诊断。 方法 性病研究实验室试验（venereal disease research laboratory test，VDRL） ：美国Pangborn等发现一种性病研究实验室抗原（VDRL