第六章 实验动物实验室的生物安全防护要求课件.ppt

第六章实验动物实验室的生物安全防护要求 主要内容 第一节 实验动物的护理和使用原则 第二节 实验过程的行为规范 第三节 实验动物使用程序和要求 第四节 动物生物安全实验室设施与防护要求 第五节 无脊椎动物使用安全原则 第一节 实验动物的护理和使用原则 实验动物是经过科学的育种、繁殖生产，遗传背景清楚，携带的微生物状况明确，并对其生态学、生物学、生物化学、形态结构了解的特殊动物，因此，对其护理和使用也有严格的要求。 1. 实验动物饲养和使用应遵守国家有关法律和规定。 2. 应明确使用实验动物的理由和目的。 3. 明确实验所使用动物的种类和数量，动物的数量应满足统计学的要求。 4. 完善操作规程，避免或减轻因实验对动物造成的不适和痛苦。包括使用适当的镇静、镇痛或麻醉方法；禁止不必要的重复。 第二节 实验过程的行为规范 实验过程的行为规范 物理限制 手术操作 饮食的限制 废弃物和尸体处理 一. 物理限制 指在实验过程中（包括检查、收集标本、给药、治疗或实验操作等），用手或工具限制动物活动的过程。 根据实验内容不同，限制时间有差异，但要求尽量缩短限制时间。有些动物，如狗和灵长类动物可以通过简单的训练达到目的。 物理限制的主要原则和要求 1. 限制的工具不能作为常规的饲养工具。 2. 工具的设计应合理，不要仅考虑实验的便利，主要考虑尽量减少动物的不适，避免伤害。 3. 尽量减少限制的时间，以达到实验目的为基准。 4. 在限制过程中，如果发生损伤或严重的行为改变，应暂停或禁止限制，并给予处理或治疗。 5. 保证实验人员和周围人员的安全。 有些实验需要对动物进行手术，即打开或刺穿动物的身体，对动物的物理或生理机能产生较大的损害，同时，实验人员也容易被血液/体液污染或被器械、针头刺伤，存在潜在生物污染的威胁，因此必须做到： 1. 操作一定要使用适当的镇静、镇痛或麻醉方法。 2. 禁止不必要的重复操作。 3. 不提倡一个动物进行多个手术实验，但为充分利用动物资源，经动物伦理委员会许可，在可能的条件下可以实施。 4. 严格实验操作规程，防止发生血液/体液外溅和针刺伤，避免生物污染。 5. 手术后的动物、标本及所用器具材料等须按规定程序处置。 实验用动物原则上要求随时饮食，如果一些实验需要动物限制食物或水的摄入量，应保证动物存活所需要的最低需求量。根据研究的目的，食物的限量应经过科学的论证，其限量的标准应容易操作，如正常摄入量的百分比或动物体重的百分比。对于水分的限量摄入，一定要防止动物发生脱水现象，并要保持动物的膳食平衡。 1. 血液和体液标本的处理 用于抗体、抗原、病原微生物、生化指标等检查的血液和体液，按照要求进行处理并检测，检测后的标本经121℃，30min高压消毒处理。 2. 动物脏器组织的处理 动物器官组织，尤其是用于病原微生物分离的组织按照标准程序进行处理；用于病理切片的组织，均需要经过甲醛固定后再进行切片。剩余的组织经121℃，30min高压消毒处理。 3．动物尸体的处理 安乐处死后的动物尸体，取材完毕后，经121℃ 30min高压灭菌处理后，集中送环保部门处理。朊病毒感染动物的处理原则参见第9章。动物生物安全三级（ABSL-3）实验室及以上级的实验室的感染动物尸体需经高压蒸汽灭菌，才能移出实验室。 4. 动物咽拭子的处理 用于病原分离和PCR检测的咽拭子，按照各自的要求处理后，进行病毒分离和PCR检测，剩余的标本经121℃，30min高压消毒处理。 5. 病原分离培养物的处理 病原分离的培养物，不论是阳性还是阴性结果，均需经121℃，30min高压消毒处理。 第三节 实验动物使用程序和要求 一. 实验动物的基本使用程序和要求 1. 实验室如需要使用实验动物，应首先向生物安全和伦理委员会提出申请，填写申请表（见附件“实验动物使用申请表”）。 2. 使用实验室得到认可后，根据申请表中申请的动物种属和数量，安排实验动物的饲养和使用。 3. 实验动物必须在指定的区域内饲养和使用，禁止在实验室饲养动物。实验操作结束时，动物须返回指定的饲养区域内，不能在实验室内过夜。 4. 动物实验应在实验室内指定的区域进行。 二. 含有感染性材料的动物实验要求 1. 涉及感染性材料的操作要在生物安全柜中进行，并防止泄露在安全柜底面。操作包括感染动物的解剖、组织的取材、采血及动物的病原接种。 2. 动物笼具在清洗前先做消毒处理。 3. 污物、一次性物品需放入医疗废物专用垃圾袋中，经高压灭菌后方可拿出实验室。 4. 动物尸体用双层医疗废物专用垃圾袋包裹后，放入标有动物尸体专用的容器中，用消毒液喷雾容器表面后，运至解剖区域剖