大学课件植物检疫学x.ppt

病原Liberobacter asiaticum （亚洲）、 Liberobacter africanum（非洲） 分类地位：原核生物界(Procaryoces)，薄壁菌门(Gracilicutes)，韧皮部杆菌属 Liberobacter 英文名称：Citrus Huanglongbing；Citrus Yellow shoot；Citrus greening * 未能在人工培养基上分离获得纯培养，在电镜下为椭圆形或短杆状的细菌，大小为30－600×500－1400?m，细胞壁厚度为25－30 ?m。革兰氏染色阴性，对四环素及青霉素敏感。根据其对热的反应和传病木虱的不同，分为两个株系：在亚洲，其发病的最适温度为27－32℃，传播介体为亚洲木虱（Diaphorina citri），病原为柑桔黄龙病原亚洲株系（L. asiaticum）；在非洲，其发病的最适温度为20－24℃,传播介体为非洲木虱 （Trioza aryteae） 病原为柑橘黄龙病非洲株系（L. africanum）。可以通过嫁接及菟丝子传播，但不能通过汁液和土壤传播。 * 传播：远距离传播主要是来自病区调运的苗木、接穗；大田主要依靠柑橘木虱进行传播，在亚洲是亚洲木虱，在非洲是非洲木虱 。 发生条件：亚洲多发生在热带亚热带地区，喜高温；在非洲多在冷凉气候下发生，30℃以上高温病害受抑制。 * 检验与检测： 1.产地检验：每年10～12月症状表现最明显 2.生物学诊断：鉴别寄主法 3.电镜检查： 4.荧光显微镜检查：黄色荧光 5.化学诊断：染色法 6.血清学检测： * 检疫与防治： 1、实行检疫? 禁止病区苗木及一切带病材料进入新区和无病区，新开辟的果园要种植无病苗。 2、建立无病苗圃，培育无病苗木 要切实做到①对优良单株进行脱毒（茎尖嫁接脱毒或热力脱毒）并经鉴定证明不带菌；②在网室内建立种质圃；③在隔离地方或在网室内建立无病母本园；④在隔离地方或在网室内建立无病苗圃。 3、挖除病株? 发现病株或可疑病株，应立即挖除，用无病苗进行补植。 4、防治柑桔木虱? 通过水肥管理控梢以减少木虱繁殖和传播。新梢期喷布1－2次杀虫剂。果园四周栽种防护林带，对木虱的迁飞也有阻碍作用。 毁 * 复习思考题 1．试述玉米细菌性萎蔫病在国外的分布状况、症状表现特点、病原分类地位、检验方法和防治措施。 2．试述梨火疫病在国外的分布状况、症状表现特点、病原分类地位、检验方法和防治措施。 3．试述水稻细菌性条斑病的症状表现特点、检验和检疫方法。 4. 细菌病害的传播特点是什么？ 5．试述细菌病害的检验与诊断要点。 6．植原体引起的病害如何检验？ * 第三节 检疫性植物病毒 * 检疫性植物病毒的检验方法 番茄环斑病毒 马铃薯帚顶病毒 *其他检疫性植物病毒 南方菜豆花叶病毒、可可枝肿病毒、香石竹环 斑病毒 了解检疫性植物病毒的种类、分布及重要性，掌握植物检疫性病毒的检验方法，掌握番茄环斑病毒、马铃薯帚顶病毒引起病害的症状、病原特性、寄主范围、病害的发生发展规律以及检验措施。 * 检疫性植物病毒的检验方法 生物学检测技术 血清学检测技术 电子显微镜技术 分子生物学检测技术 * 1.生物学检测技术 原理： 植物病毒对鉴别寄主或指示植物的特异反应。 鉴别寄主谱： 对一种病毒有特殊反应的一组寄主，一般包括3～5种不同反应类型的寄主植物。一般包括： 系统侵染的寄主 局部侵染的寄主 不受侵染的寄主 * 例1，TMV和CMV在田间烟草植株上都呈花叶症，为了确定是否有TMV，或是将两者区分开，便可通过下列三种植物的接种来确定。 * 2.血清学检测技术 原理： 抗原与抗体的特异结合 方法： 免疫电泳和免疫电镜、琼脂双扩散、ELISA等。 * 两种抗原相同，都与已知的抗血清反应 琼脂双扩散反应沉淀线判断图 抗原1 抗血清 抗原2 抗血清不专化含有两种以上的抗体 抗原2 抗原1 抗血清 抗原2 抗原1 抗血清 两种抗原有一定的亲缘关系但不完全相同 * 3.电子显微镜技术 原理： 以电磁波为光源，利用短波电子流，分辨率达到0.99?，比光学镜要高1000倍以上 主要方法： 超薄切片、负染技术、免疫电镜技术 * 4.分子生物学检测方法 分子杂交检测 PCR技术检测 * 分子杂交 在DNA和RNA之间进行，依据是RNA与互补的DNA之间存在着碱基的互补关系。 在一定的条件下，RNA--DNA形成异质双链的过程称为杂交。其中预先分离纯化或合成的已知核酸序列片段叫做杂交探针(probe)，由于大多数植物病毒的核酸是RNA，其探针为互补cDNA也称为c