医学第18章高效液相色谱法分析化学课件.pptVIP

二、定量分析方法 液相色谱法的定量方法与气相色谱法相同，常用外标法及内标对比法等进行定量分析。 1．外标法 以待测组分的纯品作对照物质，对比求算试样含量的方法称为外标法。 可分为外标工作曲线法、外标一点法及外标二点法等。 2．内标法 分为工作曲线法、内标一点法、内标二点法、内标对比法及校正因子法等，在HPLC中最常用内标对比法。 1、相对分子量 ①分子量＞2000，凝胶色谱柱 ②分子量2000，但同时分子量相差＞10%， 凝胶色谱柱 ③分子量＜2000的水溶性电解质，酸性物质用 阴离子交换树脂，碱性物质用阳离子交换树脂 三 高效液相色谱分离分析方法的选择 ④分子量＜2000的水溶性非电解质，选用反相 色谱法 ⑤分子量＜2000的非水溶性物质，弱极性物质 选用反相色谱法，极性物质选用正相色谱法。 2、溶解度 水溶性样品 离子交换色谱或液-液分配色谱 微溶于水，但在酸或 碱存在下能很好离心 的化合物 离子交换色谱 油性样品 液-固色谱法 相对非极性化合物 液-固色谱法 3、化学结构 结构特点 分离方法 离子型化合物 离子交换色谱，空间排阻和液-液分配色谱 异构体 液-固色谱法 同系物 液-液分配色谱 高分子聚合物 空间排阻色谱法 极性增加 不溶于水 溶于水 非极性 离子 非离子极性 吸附 反向分配 分配 正向分配 离子交换 尺寸排阻 凝胶渗透 凝胶过滤 分