真核表达载体的构建及对胶质瘤细胞u87mg增殖的影响课件.ppt

研究背景 INGs（INhibitor of Growth肿瘤生长抑制因子）是近些年发现一个肿瘤抑制基因家族，包括ING1、ING2/ING12L、ING3、ING4 、ING5和三种酿酒酵母INGs（Yng1、Yng2、及Pho23）, 它们彼此之间保持较高的同源性。ING4基因是新近发现的ING基因家族的新成员，定位于人12q13-32，由8个外显子和7个内含子组成，编码248个氨基酸分子。其功能可能与负性调节细胞生长和接触抑制及血管生成有关。 国外研究发现，多种肿瘤中可发现存在ING4基因的异常或ING4蛋白表达的降低，如乳腺癌、直肠癌、宫颈癌、小细胞肺癌、恶性胶质瘤及头颈部鳞状细胞癌等。 研究证实ING4 基因编码蛋白的表达水平随着脑胶质瘤恶性程度的增高而降低。ING4 基因在正常脑胶质细胞中比低度恶性脑胶质瘤中的表达水平高2～3倍，比高度恶性脑胶质瘤中的表达水平高6倍。我们有理由推测ING4基因的异常及蛋白表达降低与胶质瘤发生发展有关。 已研究证实，该因子对神经胶质瘤的基因治疗具有潜在的重要价值。为了进一步研究该因子对胶质瘤的治疗价值，我们首先构建真核表达载体pcDNA3.1-ING4,并利用脂质体Lipofectamine2000将其转入U87MG细胞，通过检测ING4基因的表达的改变及胶质瘤细胞U87MG细胞增殖所发生