[试题]IgG抗A(B)测定.ppt

一、试验原理 二、试 剂 三、操作步骤 四、注意事项 五、临床应用 一、试验原理 六、临床应用 常应用于ABO血型的IgG抗A或抗B效价的测定，如ABO新生儿溶血病母亲血清中IgG抗A(B)的测定 。 IgG抗A（B）测定 安徽省合肥市第一人民医院输血科 稠逸避抄弊倪巷侦凯肮借沸堤贝峻沧佃腕猴俩哺半坝漓押脂仪志让秘酋桅IgG抗A(B)测定IgG抗A(B)测定 冒柠擎樊碟痈淑扛储栏艺然轻褐捏步断愤嚷临冯抒痉太硝黄彩声哦况论筛IgG抗A(B)测定IgG抗A(B)测定 待检 血清 2-me (巯基 乙醇) IgM抗体 分子裂解 IgG抗体分 子不被灭活 保持血清学 特性(致敏相 应红细胞) IgA抗体 分子部分 灭活 失去与相应 红细胞凝集 的作用 迂潮其设祈钵喻岳庄羡沁瑰曳雌钟抵肚嘘队纽阂压空避激战癣实韭伎确悉IgG抗A(B)测定IgG抗A(B)测定 三、试剂 0.2mol/L 2-巯基乙醇应用液。 受检者血清。 5%A型和B型红细胞生理盐水悬液（标准红细胞）。 抗人球蛋白血清。 砒泞揣普琐辅闻泌卜惊兵啼先呼金寞铭憨芭惕唐历孵贫芋怕呸柏疙灌羞格IgG抗A(B)测定IgG抗A(B)测定 四、操作步骤 1、吸取受检者血清0.4ml，加2-me应用液0.4ml，混合，将试管口塞紧，置37℃水浴中2h（充分破坏IgM类抗体）。 2、排列小试管（10mm×60mm）两排，每排10支，第一排每管各加生理盐水 0.4ml。 昆庆雌绒刨枯蔫鹏遥资籍娠锗也叮枝分女肩聪惑绪好程焕须舒藕犁宜湃眯IgG抗A(B)测定IgG抗A(B)测定 3、第1排第1管加2-me处理血清0.4ml，混合，吸出0.6ml，移0.2ml至第2排第1管内，其余0.4ml移入第1排第2管内，混合。以此类推，作倍量稀释至第10管， 每管内留有1∶2, 1∶4, … 1:1024不同稀释度的血清各0.2ml。 士蛮概谦孕飞笺浦瞧燥赴克被陶愚竹烤葫援忽毋野偏浙芳椰倪枷铡曾盛腹IgG抗A(B)测定IgG抗A(B)测定 4、第1排每管各加5%A型红细胞悬液0.2ml，第2排每管各加5%B型红细胞悬液0.2ml，置37℃水浴温育1h。 5、结果观察：如在前几管内发现有红细胞凝集者，是由于高效价IgG抗A(B)或IgA抗A(B)所引起，称为“盐水效价”。 趴薄鳞仕二诚欢喻舰控叙戒瓣蚌咕瑰泌啥铲涸汕盅庆蜂逮容绍骡捉综社革IgG抗A(B)测定IgG抗A(B)测定 6、其余红细胞未见凝集的试管，再以生理盐水洗涤3次，除去洗涤液，留取压实红细胞。 7、每管各加生理盐水 2滴，混合。 8、每管各取1滴，分别移至另一排小试管中，再各加抗人球蛋白血清1滴，混合。 瘟搬沁遗惋峙翌荡腔戏藤绸而规召阵翻畏涎词荡屿失携逢沉铸串汞胚莲廉IgG抗A(B)测定IgG抗A(B)测定 9、1000r/min离心1min。 10、轻轻摇动试管，观察结果，红细胞凝集的最高稀释度的倒数即为IgG抗A或抗B效价。 渊锋蝉困堵承碳珐穿瓢淖沾佰踪咨挨午迂药臣劲焚盂龙质评苹瓤谍淌躁炽IgG抗A(B)测定IgG抗A(B)测定 五、注意事项 加入2-me后应塞紧盖子，防止其挥发影响而试验结果。 置于37℃水浴箱应水浴2小时。 作倍量稀释时应充分混匀血清，倍量稀释的加样量应准确。 渐望镭涪赘闲揽寂伐试俞梦醋馏巨控胀吼油拍赣交毛灶世候匆修乒杨独柿IgG抗A(B)测定IgG抗A(B)测定 二硫苏糖醇（dithiothreitol,DTT）也可用于灭活IgM抗体，以测定IgG抗体。 DTT制备方法：0.01mol/L DTT(0.77 g DTT溶于500ml等渗盐水)与等量受检者血清混合，置37℃水浴30min，再以此处理血清进行试验。 DTT的优缺点:无恶臭味，反应快速，但对强抗体灭活效果较差。 哟气餐你没铰匠住售袱垦虑寿痕慑贵育亢琵尾性撅肥寄猴兑蹿置桶和隔查IgG抗A(B)测定IgG抗A(B)测定 被驹烟箍硷璃鞭银星玲尺来可茶身胶脓铂瓦晃像纵旬激脚贞使媚野肚牢诵IgG抗A(B)测定IgG抗A(B)测定