29章 螺旋体及检验.ppt

螺旋体及检验 spirochete 根据螺旋的数目、大小和规则程度及两螺旋间的距离分为二科七属，其中对人有致病性的有三个属 。 1．疏螺旋体属（Borrelia）　　 2．密螺旋体属(Treponema) 3．钩端螺旋体属(Leptospira) 第一节 钩端螺旋体 　钩端螺旋体（Leptospira）简称钩体，能引起人及动物的钩端螺旋体病，简称钩体病。 　生物学性状 具有细密而规则的螺旋，菌体一端或两端弯曲呈钩状，常为“C”、“S”等形状。 在暗视野显微镜下可见钩体象一串发亮的微细珠粒，运动活泼 G-，但着色较难；常用Fontana镀银染色法，菌体染成棕褐色。 唯一可人工培养的致病性螺旋体，营养要求较复杂，常用含10%兔血清的柯氏（Korthof）培养基，生长缓慢 液体—云雾状生长 固体—扁平透明菌落 培养和生化反应 可人工培养，需氧，营养要求复杂 常用Korthof培养基 半固体培养基：扁平、透明、圆形菌落 生化反应：不分解糖类和蛋白质 产生过氧化氢酶 抵 抗 力 热，酸：抵抗力弱 湿土或水中：存活6w以上 （传播上有意义） 分 类 1．按抗原构造分类 表面抗原：多糖蛋白复合物， 型特异性－分型 内部抗原：类脂多糖复合物, 几种钩体共有-分群 2．按DNA同源性分类 DNA杂交技术 　致病性 （一）致病物质 1．内毒素样物质 　2．溶血素 　3．细胞毒性因子 4. 致细胞病变作用因子 由于钩体的菌型、毒力、数量不同以及机体免疫力强弱不同，病程发展和症状轻重差异很大，临床上常见有下列几种类型： 1．流感伤寒型 2．黄疸出血型 3．肺出血型 4. 肾功能衰竭型 部分病人可出现恢复期并发症，如眼葡萄膜炎、脑动脉炎、失明、瘫痪等，可能是由于变态反应所致。 　免疫性 钩体隐性感染或病后可获得对同型钩体的持久免疫力，以体液免疫为主，细胞免疫作用不大。 微生物学检查法 (一)检查螺旋体 取材:1w内:血,2w后:尿,脑膜刺激症状:脑脊液 检查方法: 1．直接镜检 暗视野法,镀银染色法 2．分离培养与鉴定 Korthof培养基,25 ～ 30℃,2～4w 3．动物实验(接种) 豚鼠,黄地鼠 4．其他 同位素,生物素标记DNA探针,PCR (快速、敏感) (二)血清学诊断 常用的方法(补体结合试验查特异性抗体) 病程早、晚双份血清 第二节 梅毒螺旋体 梅毒螺旋体（Treponema Pallidun）是梅毒的病原体，因其透明，不易着色，故又称苍白螺旋体。 形态与染色 形态:细长卷曲，两端尖直，8～14个 致密而规则的螺旋，运动活泼 轴丝:运动器官 染色:Giemsa法:红色 镀银染色法:棕褐色 观察:暗视野法(形态,运动) 培 养 Nichols株(Nichols strain): 有毒力 在家兔睾丸或眼前房内接种可获得 Reiter株(Reiter strain): 失去致病力 转种于含有多种氨基酸的兔睾丸碎片， 厌氧培养用作多种梅毒血清诊断的抗原 抗原构造 密螺旋体抗原 梅毒螺旋体表面特异性抗原 非螺旋体抗原 磷脂类抗原 抵抗力 抵抗力:极弱 湿热,干燥:特别敏感 体外迅速死亡 砷、汞制剂和青、红、庆大霉素:敏感 –78℃保存一年,有感染力 致病因素 1.降低免疫因素的物质 (1)粘多糖和唾酸:阻止补体激活， 干扰补体杀菌 (2)PGE2:刺激巨噬细胞的吞噬活性 (3)单核细胞:对有丝分裂原反应降低 (4)Ig:抑制NK活性 2.粘附性 透明质酸酶 (1)吸附 (2)分解透明质酸-破坏组织、毛细血管 3.免疫病理损伤 二期梅毒:免疫复合物 三期梅毒:树胶肿 所致疾病 传染源:性接触-梅毒(皮肤粘膜) 垂直传染(母-胎)-先天性梅毒 输血-输血后梅毒 (血液) 梅毒:分为3期 (1)第一期 (2)第二期(早期梅毒) (3)第三期(晚期梅毒) 一期梅毒：梅毒螺旋体侵入皮肤粘膜约三周后，在侵入局部出现无痛性硬结及溃疡，称硬性下疳。下疳多发生于外生殖器，其溃疡渗出物含有大量梅毒螺旋体，传染性极强。下疳常可自然愈合，约2～3个月无症状的隐伏期后进入