第19章 免疫缺陷及免疫应用PPT课件.pptVIP

检测各群体淋巴细胞的数量与功能是观察机体免疫状态的重要手段。外周血是病人主要的检测标本，但仅代表再循环的淋巴细胞。实验动物还可取胸腺、脾、淋巴结等作为标本进行检查。 二、免疫细胞的检测 PBMC 多形核白细胞 红细胞 血浆 分离液 玻璃平皿 单核细胞吸附,未吸附的为淋巴细胞. 根据比重的不同将血液离心分层 取PBMC 一 免疫细胞的分离 1.外周血单个核细胞的分离 常用密度梯度离心法 2.亚群的分离 尼龙棉柱分离----B细胞 E花环分离---------T细胞 流式细胞术 免疫磁珠 T E花环 流式细胞仪工作原理 3、淋巴细胞亚群的计数 根据表面标志不同，分类计数 免疫荧光 酶免疫组化 流式细胞术 二、免疫细胞功能测定 1、T细胞功能试验： T细胞增殖试验 3H-TdR掺入法 MTT法 细胞毒试验 2、B细胞功能测定：溶血空斑试验 3、皮肤实验： 检测细胞免疫功能 淋巴细胞转化试验（形态学示意图） 原理：人T细胞表面有PHA或ConA受体，T细胞在体外受PHA或ConA的刺激后能转化为体积较大、代谢旺盛、且能进行分裂的淋巴细胞，以此测定T细胞的功能。 PHA刺激 48~72小时 发病机制及免疫学异常 感染宿主细胞导致 （1）病毒大量复制，细胞死亡 （2）细胞间融合 （多核巨细胞，细胞死亡） （3）CD4/CD8比例下降、倒置 Th数量下降，功能缺陷 B细胞多克隆激活 Mφ ， IL-1，TNF-a升高 NK下降，恶性肿瘤、病毒性感染发生率升高 （四） 免疫缺陷病的治疗原则 ①控制感染 ②免疫重建 ③基因治疗 ④免疫制剂 （一）概念和基本特征 自身免疫性疾病（autoimmune disease, AID） 是指由于过度而持久的自身免疫应答，导致自身组织损伤和（或）功能障碍而引起的一类疾病。 二、自身免疫性疾病 基本特征： 1.?患者血液中可测到高效价自身抗体和/或自身应答 性T淋巴细胞 2. 自身抗体和/或自身应答性T淋巴细胞作用于表达 相应抗原的组织细胞，造成结构损伤或功能障碍 3. 动物实验可复制出与自身免疫病相似的动物模型，用患者血清或致敏淋巴细胞可使疾病转移，某些自身抗体可通过胎盘引起新生儿自身免疫病 4. 病情转归与自身免疫反应的强度密切相关 5.?反复发作、慢性迁延 6.?有遗传倾向，易发生于女性 器官特异性自身免疫病（organ specific autoimmune disease）：病变常局限于某一特定的器官，由对器官特异性抗原的免疫应答引起； 器官非特异性自身免疫病（non-organ specific autoimmune disease）：又称全身性/系统性自身免疫病/结缔组织病/胶原病，病变可见于多种器官和结缔组织； （二）、自身免疫病的分类 机制： 自身抗体和（或）自身反应性T淋巴细胞介导的自身细胞或自身成分发生的免疫应答 与某些超敏反应发病机制相同 典型疾病： 自身免疫性溶血性贫血 自身免疫性血小板减少性紫癜 自身免疫性中性粒细胞减少症 毒性弥漫性甲状腺肿（Graves’disease） （三）、损伤机制及典型疾病 确切原因目前仍不很清楚 1、抗原方面的因素 免疫隔离部位抗原的释放 自身抗原的改变 分子模拟 2、免疫系统方面的因素 免疫忽视的打破 表位扩展 3、遗传因素 （四）、发病相关因素 1、预防和控制微生物 2、应用免疫抑制剂 3、应用细胞因子及其受体的阻断剂 4、重建对自身抗原的特异性免疫耐受 （五）、治疗原则 肿瘤免疫是研究肿瘤免疫原性、机体对肿瘤的免疫监视和免疫应答、肿瘤的免疫逃逸机制以及肿瘤的免疫诊断与免疫防治 三、肿瘤免疫 1、化学或物理的因素诱发的肿瘤抗原 2、病毒诱发的肿瘤抗原 3、自发性肿瘤抗原 4、胚胎抗原或分化抗原 （一）、肿瘤抗原 ①免疫原性强的肿瘤，主要通过适应性免疫应答发挥作用； ②免疫原性弱的肿瘤主要通过固有性免疫应答机制发挥作用； ③CD8+CTL介导的细胞免疫应答起重要的作用； ④CD4+Th细胞通过分泌各种细胞因子以及辅助诱导和激活CD8+CTL （二）