外源基因在大肠杆菌中的表达..pptVIP

A 大肠杆菌作为表达外源基因受体菌的特征 A 大肠杆菌作为表达外源基因受体菌的特征 B 外源基因在大肠杆菌中高效表达的原理 C 大肠杆菌基因工程菌的构建策略 D 基因工程菌的遗传不稳定性及其对策 E 利用重组大肠杆菌生产人胰岛素 D 基因工程菌的遗传不稳定性及其对策 改善基因工程菌不稳定性的策略 控制目的基因的过量表达 使用可控型启动子控制目的基因的定时表达及表达程度 使用可控型复制子控制质粒的定时增殖或降低质粒的拷贝数 优化基因工程菌的培养工艺 培养基组成：限制培养基比丰富培养基更有利于稳定 培养温度： 较低的培养温度有利于重组质粒的稳定 7 外源基因在大肠杆菌中的表达 胰岛素的结构及其生物合成 人胰岛素的生产方法 重组人胰岛素的大肠杆菌工程菌的构建 人胰岛素的生产方法 直接提取法制人胰岛素 迄今为止，有四种大规模生产人胰岛素的方法： 早期人的胰岛素是从人的胰脏中直接分离纯化的，由于原料 供应的限制，其产量远远不能满足日益增多的糖尿病人的临 床需求。 人胰岛素的生产方法 化学合成法制人胰岛素 根据人胰岛素A链和B链的序列，由单个氨基酸从头合成。这 条化学全合成的路线从技术上来说是能够做到的，但其生产 成本奇高，从而也限制了产品的广泛应用。 包涵体型异源蛋白的表达 包涵体的变性与复性操作 包涵体的复性与重折叠（refolding）：二硫键形成